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L'effettu sinergicu di l'olii essenziali nantu à l'adulti aumenta a toxicità di permethrin contru Aedes aegypti (Diptera: Culicidae) |

In un prughjettu precedente chì testava e piante di trasfurmazioni alimentari lucali per i mosquitoes in Tailanda, l'olii essenziali (EO) di Cyperus rotundus, galanga è cannella sò stati trovati per avè una bona attività anti-mosquito contru Aedes aegypti.In un tentativu di riduce l'usu di tradiziunaliinsetticidiè migliurà u cuntrollu di e populazioni di mosquito resistenti, stu studiu hà u scopu di identificà u sinergismu potenziale trà l'effetti adulticidi di l'oxidu d'etilene è a toxicità di permethrin à i mosquitoes Aedes.aegypti, inclusi i ceppi sensibili è resistenti à i piretroidi.
Per evaluà a cumpusizioni chimica è l'attività di uccisione di EO estratti da rizomi di C. rotundus è A. galanga è scorcia di C. verum contr'à a ceppa suscettibile Muang Chiang Mai (MCM-S) è a ceppa resistente Pang Mai Dang (PMD-R). ).) Adultu attivu Ae.Aedes aegypti.Un bioassay per adulti di a mistura EO-permetrina hè statu ancu realizatu nantu à sti mosquito Aedes per capisce a so attività sinergica.ceppi aegypti.
Caratterizazione chimica cù u metudu analiticu GC-MS hà dimustratu chì i cumposti 48 sò stati identificati da l'EO di C. rotundus, A. galanga è C. verum, cuntendu 80,22%, 86,75% è 97,24% di i cumpunenti totali, rispettivamente.Cyperene (14,04%), β-bisabolene (18,27%), è cinnamaldehyde (64,66%) sò i cumpunenti principali di l'oliu di cyperus, l'oliu di galanga è l'oliu balsamicu, rispettivamente.In l'assai di uccisione di l'adulti biologichi, C. rotundus, A. galanga è C. verum EVs eranu efficaci à tumbà Ae.aegypti, i valori LD50 di MCM-S e PMD-R erano rispettivamente 10,05 e 9,57 μg/mg femminili, 7,97 e 7,94 μg/mg femminili, e 3,30 e 3,22 μg/mg femminili.Efficienza di MCM-S è PMD-R Ae in a morte di l'adulti.aegypti in questi EO era vicinu à u butossidu di piperonyl (valori PBO, LD50 = 6,30 è 4,79 μg/mg femminile, rispettivamente), ma micca cusì pronunciatu cum'è permetrina (valori LD50 = 0,44 è 3,70 ng/mg femminile rispettivamente).Tuttavia, i bioassaggi combinati anu truvatu sinergia trà EO è permetrina.Sinergismu significativu cù permethrin contru dui ceppi di mosquitoes Aedes.Aedes aegypti hè stata nutata in l'EM di C. rotundus è A. galanga.L'aggiunta di olii C. rotundus è A. galanga hà riduciutu significativamente i valori LD50 di permetrina nantu à MCM-S da 0,44 à 0,07 ng/mg è 0,11 ng/mg in e femine, rispettivamente, cù valori di ratio di sinergia (SR) di 6,28 è 4,00 rispettivamente.Inoltre, C. rotundus è A. galanga EO anu riduciutu ancu significativamente i valori LD50 di permetrina nantu à PMD-R da 3,70 à 0,42 ng/mg è 0,003 ng/mg in femine, rispettivamente, cù valori SR di 8,81 è 1233.33, rispettivamente..
Effettu sinergicu di una cumminazione EO-permetrina per rinfurzà a toxicità per l'adulti contr'à dui ceppi di mosquito Aedes.Aedes aegypti dimostra un rolu promettente per l'ossidu d'etilene cum'è sinergiista in rinfurzà l'efficacità anti-mosquito, soprattuttu induve i composti tradiziunali sò inefficaci o inappropriati.
U mosquito Aedes aegypti (Diptera: Culicidae) hè u principale vettore di a febbre dengue è altre malatie virali infettive cum'è a febbre gialla, u chikungunya è u virus Zika, chì ponenu una minaccia enormosa è persistente per l'omu [1, 2]..U virus Dengue hè a febbre emorragica patogena più seria chì affetta l'omu, cù una stima di 5-100 milioni di casi annuali è più di 2,5 miliardi di persone in u mondu in u risicu [3].I focu di sta malatia infettiva ponenu un pesu enormu nantu à e pupulazioni, i sistemi di salute è l'economie di a maiò parte di i paesi tropicali [1].Sicondu u Ministeru di a Salute tailandese, ci sò stati 142,925 casi di febbre dengue è 141 morti signalati in tuttu u paese in 2015, più di trè volte u numeru di casi è morti in 2014 [4].Malgradu l'evidenza storica, a febbre dengue hè stata eradicata o assai ridutta da u mosquito Aedes.Dopu à u cuntrollu di Aedes aegypti [5], i tassi di infezzione anu aumentatu drasticamente è a malatia si sparse in u mondu, in parte à causa di decennii di riscaldamentu glubale.Eliminazione è cuntrollu di Ae.Aedes aegypti hè relativamente difficiule perchè hè un vettore di zanzara domestica chì s'accoppia, nutre, riposa è depone l'ova in l'abitazione umana è intornu à u ghjornu.Inoltre, stu mosquito hà a capacità di adattà à i cambiamenti ambientali o disturbi causati da avvenimenti naturali (cum'è a siccità) o misure di cuntrollu umanu, è pò turnà à i so numeri originali [6, 7].Perchè i vaccini contr'à a febbre dengue sò stati appruvati di pocu tempu è ùn ci hè micca un trattamentu specificu per a febbre dengue, a prevenzione è a riduzione di u risicu di a trasmissione di dengue dipende interamente da u cuntrollu di i vettori di mosquito è l'eliminazione di u cuntattu umanu cù i vettori.
In particulare, l'usu di i sustanzi chimichi per u cuntrollu di mosquito avà ghjoca un rolu impurtante in a salute publica cum'è un cumpunente impurtante di a gestione integrata di vettori.I metudi chimichi più populari includenu l'usu di insetticidi à pocu tòxicu chì agiscenu contr'à e larva di mosquito (larvicidi) è mosquitoes adulti (adocidi).U cuntrollu di larva per a riduzzione di a fonte è l'usu regulare di larvicidi chimichi cum'è l'organofosfati è i regulatori di crescita di l'insetti hè cunsideratu impurtante.Tuttavia, l'impatti ambientali avversi assuciati à i pesticidi sintetici è u so mantenimentu intensivu di travagliu è cumplessu restanu una preoccupazione maiò [8, 9].U cuntrollu di u vettore attivu tradiziunale, cum'è u cuntrollu di l'adulti, resta u mezzu più efficau di cuntrollu durante i focu virali perchè pò eradicate i vettori di malatie infettive rapidamente è à grande scala, è ancu riduce a vita è a longevità di e populazioni di vettori lucali [3]., 10].Quattru classi di insetticidi chimichi: organochlorines (riferitu solu DDT), organofosforati, carbamates è piretroidi formanu a basa di i prugrammi di cuntrollu di vettori, cù i piretroidi cunsiderati a classa più riescita.Sò assai efficaci contru diversi artropodi è anu una efficacità bassa.toxicità per i mammiferi.Attualmente, i piretroidi sintetici custituiscenu a maiò parte di i pesticidi cummirciali, cuntendu circa 25% di u mercatu globale di pesticidi [11, 12].A permetrina è a deltametrina sò insetticidi piretroidi di spettru largu chì sò stati usati in u mondu per decennii per cuntrullà una varietà di pesti d'impurtanza agricula è medica [13, 14].In l'anni 1950, u DDT hè statu sceltu cum'è a chimica di scelta per u prugramma naziunale di cuntrollu di zanzara di salute publica di Tailanda.Dopu à l'usu generalizatu di DDT in e zone endemichi di malaria, a Tailanda hà gradualmente eliminatu l'usu di DDT trà u 1995 è u 2000 è l'hà rimpiazzatu cù dui piretroidi: permetrina è deltametrina [15, 16].Questi insetticidi piretroidi sò stati introdotti à l'iniziu di l'anni 1990 per cuntrullà a malaria è a febbre dengue, principarmenti per via di trattamenti di lettu è l'usu di nebbie termali è sprays di toxicità ultra-bassa [14, 17].Tuttavia, anu persu l'efficacezza per via di a forte resistenza di mosquito è a mancanza di rispettu publicu per via di preoccupazioni per a salute publica è l'impattu ambientale di i sustanzi chimichi sintetici.Questu pone sfidi significativi à u successu di i prugrammi di cuntrollu di vettori di minaccia [14, 18, 19].Per fà a strategia più efficace, sò necessarie contramisuri puntuali è adatti.I prucedure di gestione cunsigliate includenu a sustituzione di sustanzi naturali, a rotazione di sustanzi chimichi di diverse classi, l'aghjunzione di sinergisti, è a mistura di sustanzi chimichi o l'applicazione simultanea di sustanzi chimichi di diverse classi [14, 20, 21].Per quessa, ci hè un urgente bisognu di truvà è sviluppà una alternativa è sinergia ecologica, còmuda è efficace è stu studiu hà per scopu di affruntà sta necessità.
Insetticidi naturali derivati ​​​​, in particulare quelli basati in cumpunenti di a pianta, anu dimustratu u putenziale in a valutazione di l'alternative di cuntrollu di mosquito attuali è futuri [22, 23, 24].Diversi studii anu dimustratu chì hè pussibule cuntrullà i vettori di mosquito impurtanti utilizendu prudutti vegetali, in particulare olii essenziali (EO), cum'è assassini adulti.Pruprietà adulticida contr'à alcune spezie di zanzara impurtanti sò state trovate in parechji olii vegetali cum'è sedano, cumin, zedoaria, anice, pepe pipe, timo, Schinus terebinthifolia, Cymbopogon citratus, Cymbopogon schoenanthus, Cymbopogon giganteus, Chenopodium ambrosioides, Cochlospermu et cornisptuchoniis. ., Eucalyptus citriodora, Cananga odorata è Petroselinum Criscum [25,26,27,28,29,30].L'oxidu d'etilene hè oghji utilizatu micca solu solu, ma ancu in cumminazione cù sustanzi vegetali estratti o pesticidi sintetici esistenti, chì producenu varii gradi di toxicità.Cumminzioni di insetticidi tradiziunali, cum'è organofosfati, carbamates è piretroidi cù l'oxidu di etilene / estratti vegetali agisce in modu sinergicu o antagonisticu in i so effetti tossichi è sò stati dimustrati per esse efficaci contr'à i vettori di malatie è pesti [31,32,33,34,35].In ogni casu, a maiò parte di i studii nantu à l'effetti tossichi sinergichi di cumminazzioni di fitochimichi cù o senza chimichi sintetici sò stati fatti nantu à i vettori di l'insetti agriculi è i pesti in quantu à i mosquitoes medically important.Inoltre, a maiò parte di u travagliu nantu à l'effetti sinergichi di e cumminzioni di insecticidi vegetali-sintetici contr'à i vettori di mosquito hà focu annantu à l'effettu larvicida.
In un studiu precedente realizatu da l'autori cum'è parte di un prughjettu di ricerca in corso di screening intimicidi da e piante alimentari indigene in Tailanda, l'ossidi di etilene da Cyperus rotundus, galanga è cannella sò stati trovati per avè attività potenziale contr'à Aedes adulti.Egittu [36].Per quessa, stu studiu hà u scopu di valutà l'efficacità di l'EO isolati da queste piante medicinali contr'à i mosquitos Aedes.aegypti, inclusi i ceppi sensibili è resistenti à i piretroidi.L'effettu sinergicu di i mischi binari di l'ossidu di etilene è i piretroidi sintetici cù una bona efficacità in l'adulti hè statu ancu analizatu per riduce l'usu di insetticidi tradiziunali è aumentanu a resistenza à i vettori di mosquito, in particulare contru Aedes.Aedes aegypti.Questu articulu informa a carattarizazione chimica di l'olii essenziali efficaci è u so potenziale per rinfurzà a toxicità di permethrin sinteticu contru i mosquitoes Aedes.aegypti in ceppi sensibili ai piretroidi (MCM-S) e ceppi resistenti (PMD-R).
I rizomi di C. rotundus è A. galanga è a cortezza di C. verum (Fig. 1) utilizati per l'estrazione di l'oliu essenziale sò stati acquistati da i fornituri di erbe medicinali in a pruvincia di Chiang Mai, Tailanda.L'identificazione scientifica di sti pianti hè stata ottenuta per cunsultazione cù u sgiò James Franklin Maxwell, Botanicu Herbarium, Dipartimentu di Biologia, College of Science, Università di Chiang Mai (CMU), Provincia di Chiang Mai, Tailanda, è u scientist Wannari Charoensap;in u Dipartimentu di Farmacia, College of Pharmacy, Carnegie Mellon University, Ms. Voucher specimens di ogni pianta sò cullucati in u Dipartimentu di Parasitology à Carnegie Mellon University School of Medicine per u futuru usu.
I campioni di e piante sò stati secchi in ombra individualmente per 3-5 ghjorni in un spaziu apertu cù ventilazione attiva è una temperatura ambientale di circa 30 ± 5 ° C per sguassà u cuntenutu di umidità prima di l'estrazione di l'olii essenziali naturali (EO).Un totale di 250 g di ogni materiale vegetale seccu hè stata macinata meccanicamente in un polveru grossu è utilizatu per isolà l'olii essenziali (EO) per distillazione di vapore.L'apparechju di distillazione era custituitu da un mantellu di riscaldamentu elettricu, un flask à fondu tondu 3000 mL, una colonna d'estrazione, un condensatore è un dispositivu Cool ace (Eyela Cool Ace CA-1112 CE, Tokyo Rikakikai Co. Ltd., Tokyo, Japan) .Aghjunghjite 1600 ml d'acqua distillata è 10-15 perle di vetru à u fiasco è poi scaldate à circa 100 ° C cù un riscaldatore elettricu per almenu 3 ore finu à chì a distillazione hè cumpleta è ùn hè più produttu EO.A capa EO hè stata siparata da a fase aquosa cù un funnel separatore, secca nantu à sulfate di sodiu anidru (Na2SO4) è guardatu in una buttiglia marrone sigillata à 4 ° C finu à chì a cumpusizioni chimica è l'attività adulta sò state esaminate.
A cumpusizioni chimica di l'olii essenziali hè stata realizata simultaneamente cù u bioassay per a sustanza adulta.L'analisi qualitativa hè stata realizata utilizendu un sistema GC-MS custituitu da un gascromatografu Hewlett-Packard (Wilmington, CA, USA) 7890A equipatu di un detector selettivu di massa quadrupole unicu (Agilent Technologies, Wilmington, CA, USA) è un MSD 5975C (EI). ).(Tecnulugie Agilent).
Colonna cromatografica - DB-5MS (30 m × ID 0,25 mm × spessore di film 0,25 µm).U tempu tutale di GC-MS era di 20 minuti.I cundizioni di l'analisi sò chì a temperatura di l'injector è di a linea di trasferimentu sò 250 è 280 ° C, rispettivamente;a temperatura di u furnace hè stallatu per aumentà da 50 ° C à 250 ° C à un ritmu di 10 ° C / min, u gasu trasportatore hè l'heliu;flussu 1,0 ml/min;u voluminu di iniezione hè 0,2 µL (1/10% in volume in CH2Cl2, split ratio 100:1);Un sistema di ionizazione di l'elettroni cù una energia di ionizazione di 70 eV hè utilizatu per a rilevazione GC-MS.A gamma di acquisizione hè 50-550 unità di massa atomica (amu) è a velocità di scansione hè 2,91 scans per seconda.I percentuali relative di cumpunenti sò spressi cum'è percentuali nurmalizzati da l'area di punta.L'identificazione di l'ingredienti EO hè basatu annantu à u so indice di ritenzione (RI).RI hè statu calculatu utilizendu l'equazioni di Van den Dool è Kratz [37] per a serie n-alcanes (C8-C40) è paragunatu cù indici di ritenzione da a literatura [38] è e basa di dati di biblioteca (NIST 2008 è Wiley 8NO8).L'identità di i cumposti mostrati, cum'è a struttura è a formula molekulari, hè stata cunfirmata per paragunà cù i campioni autentichi dispunibili.
I normi analitici per permethrin sinteticu è piperonyl butoxide (PBO, cuntrollu pusitivu in studii di sinergia) sò stati acquistati da Sigma-Aldrich (St. Louis, MO, USA).I kit di teste per l'adulti di l'Organizazione Mondiale di a Salute (OMS) è e dosi diagnostiche di carta impregnata di permetrina (0,75%) sò stati acquistati cummerciale da u Centru di Controlu Vettore di l'OMS in Penang, Malaysia.Tutti l'altri chimichi è reagenti utilizati eranu di qualità analitica è sò stati acquistati da istituzioni lucali in a pruvincia di Chiang Mai, Tailanda.
I mosquitoes utilizati cum'è organismi di teste in u bioassay per l'adulti sò stati accoppiati liberamente mosquitoes Aedes di laboratoriu.aegypti, cumprese a ceppa sensibile Muang Chiang Mai (MCM-S) è a ceppa resistente Pang Mai Dang (PMD-R).Strain MCM-S hè stata ottenuta da campioni lucali raccolti in l'area di Muang Chiang Mai, Pruvincia di Chiang Mai, Tailanda, è hè stata mantenuta in a sala di entomologia di u Dipartimentu di Parasitologia, CMU School of Medicine, dapoi u 1995 [39].A ceppa PMD-R, chì hè stata trovata per esse resistente à permethrin, hè stata isolata da i mosquitoes di u campu urigginariamente raccolti da Ban Pang Mai Dang, District Mae Tang, Pruvincia di Chiang Mai, Tailanda, è hè stata mantenuta in u stessu istitutu dapoi u 1997 [40]. ].I ceppi PMD-R sò stati cultivati ​​sottu pressione selettiva per mantene i livelli di resistenza per esposizione intermittente à 0.75% permetrina utilizendu u kit di rilevazione di l'OMS cù alcune modificazioni [41].Ogni ceppo di Ae.Aedes aegypti hè statu culunizatu individualmente in un laboratoriu senza patogeni à 25 ± 2 ° C è 80 ± 10% di umidità relativa è un fotoperiodu di luce / scuru di 14:10 h.Circa 200 larvati sò stati guardati in tavulini di plastica (33 cm long, 28 cm wide è 9 cm high) chinu cù l'acqua di l'acqua à una densità di 150-200 larvae per tassa è alimentati duie volte à ghjornu cù biscotti di cani sterilizzati.I vermi adulti sò stati guardati in gabbie umidi è alimentati continuamente cù una solu suluzione di saccarosi 10% è una suluzione di sciroppu multivitaminicu 10%.I mosquitoes femini sughjenu regularmente u sangue per pona l'ova.E femine da dui à cinque ghjorni chì ùn sò micca stati alimentati di sangue ponu esse aduprate in modu cuntinuu in test biologichi sperimentali adulti.
Un bioassay di risposta dose-mortalità di EO hè statu realizatu nantu à e femmine adulte di zanzara Aedes.aegypti, MCM-S è PMD-R utilizendu un metudu topicu mudificatu secondu u protocolu standard di l'OMS per a prova di sensibilità [42].L'EO da ogni pianta hè stata diluita seriamente cù un solvente adattatu (per esempiu, etanol o acetone) per ottene una serie graduata di concentrazioni 4-6.Dopu l'anesthesia cù diossidu di carbonu (CO2), i mosquitoes sò stati pisati individualmente.I moschiti anestesiati sò stati tandu immobile nantu à carta di filtru seccu nantu à una piastra fredda persunalizata sottu un stereomicroscopiu per impediscenu a riattivazione durante a prucedura.Per ogni trattamentu, 0,1 μl di soluzione EO hè stata applicata à u pronotum superiore di a femina cù un microdispenser portatile Hamilton (700 Series Microliter™, Hamilton Company, Reno, NV, USA).Vinticinque femine sò state trattate cù ogni cuncentrazione, cù a mortalità chì varieghja da u 10% à u 95% per almenu 4 cuncentrazioni differenti.Mosquitoes trattati cù solvente servenu cum'è cuntrollu.Per prevene a contaminazione di i campioni di prova, rimpiazzà a carta di filtru cù una nova carta di filtru per ogni EO testatu.I dosi utilizati in questi bioassays sò spressi in microgrammi di EO per milligrammu di pesu di corpu femminile vivu.L'attività di PBO di l'adulti hè stata ancu valutata in una manera simile à l'EO, cù PBO utilizatu com'è cuntrollu pusitivu in esperimenti sinergichi.I mosquitoes trattati in tutti i gruppi sò stati posti in tazzi di plastica è datu 10% sucrose plus 10% sciroppu multivitaminicu.Tutti i bioassays sò stati realizati à 25 ± 2 ° C è 80 ± 10% umidità relativa è ripetutu quattru volte cù cuntrolli.A mortalità durante u periodu di crianza di 24 ore hè stata verificata è cunfirmata da a mancanza di risposta di u mosquito à l'estimulazione meccanica è poi registrata basatu annantu à a media di quattru replicati.I trattamenti sperimentali sò stati ripetuti quattru volte per ogni mostra di prova utilizendu diverse lotte di mosquitoes.I risultati sò stati riassunti è utilizati per calculà a rata di mortalità percentuale, chì hè stata utilizata per determinà a dosa letale di 24 ore per analisi probit.
L'effettu anticidale sinergicu di EO è permethrin hè statu valutatu cù una prucedura di analisi di toxicità lucale [42] cum'è descritta prima.Aduprate acetone o etanol com'è solvente per preparà permethrin à a cuncentrazione desiderata, è ancu una mistura binaria di EO è permethrin (EO-permethrin: permethrin mischju cù EO à a concentrazione LD25).I kit di prova (permetrina è EO-permetrina) sò stati valutati contr'à ceppi MCM-S è PMD-R di Ae.Aedes aegypti.Ciascuna di 25 mosquitoes femini hè stata data quattru dosi di permetrina per pruvà a so efficacità in l'uccisione di l'adulti, cù ogni trattamentu ripetutu quattru volte.Per identificà i sinergisti EO candidati, da 4 à 6 dosi di EO-permetrin sò stati amministrati à ognunu di 25 mosquitoes femine, cù ogni applicazione ripetuta quattru volte.Trattamentu PBO-permetrina (permetrina mischju cù a concentrazione LD25 di PBO) hà ancu servitu cum'è un cuntrollu pusitivu.I dosi utilizati in questi bioassays sò spressi in nanogrammi di mostra di prova per milligrammu di pesu di corpu femminile vivu.Quattru valutazioni sperimentali per ogni ceppa di mosquito sò state realizate nantu à lotti allevati individualmente, è e dati di mortalità sò stati cumulati è analizati cù Probit per determinà una dosa letale di 24 ore.
A rata di mortalità hè stata aghjustata cù a formula di Abbott [43].I dati ajustati sò stati analizati da l'analisi di regressione Probit utilizendu u prugramma di statistiche di l'informatica SPSS (versione 19.0).I valori letali di 25%, 50%, 90%, 95% è 99% (LD25, LD50, LD90, LD95 è LD99, rispettivamente) sò stati calculati cù l'intervalli di cunfidenza 95% currispondenti (95% CI).E misurazioni di significazione è differenze trà i campioni di teste sò stati valutati cù u test chi-square o u test Mann-Whitney U in ogni analisi biologica.I risultati sò stati cunsiderati statisticamente significativi à P< 0,05.U coefficient di resistenza (RR) hè stimatu à u livellu LD50 utilizendu a seguente formula [12]:
RR > 1 indica resistenza, è RR ≤ 1 indica sensibilità.U valore di u rapportu di sinergia (SR) di ogni candidatu di sinergia hè calculatu cum'è seguente [34, 35, 44]:
Stu fattore divide i risultati in trè categurie: un valore SR di 1±0.05 hè cunsideratu senza effettu apparente, un valore SR di> 1.05 hè cunsideratu cum'è un effettu sinergicu, è un valore SR di A oliu liquidu giallu chjaru pò esse. ottenuta da a distillazione di vapore di i rizomi di C. rotundus è A. galanga è l'corteza di C. verum.I rendimenti calculati nantu à u pesu seccu eranu 0,15%, 0,27% (w / w) è 0,54% (v / v).w) rispettivamente (Table 1).Studiu GC-MS di a cumpusizioni chimica di l'olii di C. rotundus, A. galanga è C. verum dimustratu a prisenza di 19, 17 è 21 cumposti, chì cuntavanu 80,22, 86,75 è 97,24% di tutti i cumpunenti, rispettivamente (Table 2). ).C. lucidum rhizome oliu cumposti principarmenti custituitu di cyperonene (14,04%), seguita da carralene (9,57%), α-capsellan (7,97%), è α-capsellan (7,53%).U principale cumpunente chimicu di l'oliu di rizoma di galanga hè β-bisabolene (18,27%), seguitu da α-bergamotene (16,28%), 1,8-cineole (10,17%) è piperonol (10,09%).Mentri cinnamaldehyde (64,66%) hè statu identificatu cum'è u cumpunente principale di l'oliu di cortezza di C. verum, acetate cinnamic (6,61%), α-copaene (5,83%) è 3-phenylpropionaldehyde (4,09%) sò cunsiderate ingredienti minori.E strutture chimichi di cyperne, β-bisabolene è cinnamaldehyde sò i cumposti principali di C. rotundus, A. galanga è C. verum, rispettivamente, cum'è mostra in Figura 2.
I risultati di trè OO anu valutatu l'attività adulta contr'à i mosquitos Aedes.i mosquitoes aegypti sò mostrati in a Table 3. Tutti l'EO sò stati truvati per avè effetti letali nantu à i mosquitoes MCM-S Aedes in diversi tipi è dosi.Aedes aegypti.L'EO più efficace hè C. verum, seguita da A. galanga è C. rotundus cù valori LD50 di 3,30, 7,97 è 10,05 μg/mg MCM-S femminili rispettivamente, ligeramente più altu di 3,22 (U = 1), Z = -0,775, P = 0,667), 7,94 (U = 2, Z = 0, P = 1) è 9,57 (U = 0, Z = -1,549, P = 0,333) μg/mg PMD -R in donne.Questu currisponde à u PBO chì hà un effettu adultu ligeramente più altu nantu à PMD-R cà a ceppa MSM-S, cù valori LD50 di 4,79 è 6,30 μg/mg femmine, rispettivamente (U = 0, Z = -2,021, P = 0,057) .).Pò esse calculatu chì i valori LD50 di C. verum, A. galanga, C. rotundus è PBO contru PMD-R sò circa 0,98, 0,99, 0,95 è 0,76 volte più bassu di quelli contru MCM-S, rispettivamente.Cusì, questu indica chì a suscettibilità à PBO è EO hè relativamente simile trà e duie ceppi Aedes.Ancu se PMD-R era più suscettibile cà MCM-S, a sensibilità di Aedes aegypti ùn era micca significativa.In cuntrastu, i dui ceppi di Aedes differivanu assai in a so sensibilità à permethrin.aegypti (Tableau 4).PMD-R hà dimustratu una resistenza significativa à permetrina (valore LD50 = 0,44 ng/mg in donne) cù un valore LD50 più altu di 3,70 cumparatu cù MCM-S (valore LD50 = 0,44 ng/mg in donne) ng/mg in donne (U = 0, Z = -2,309, P = 0,029).Ancu PMD-R hè assai menu sensibile à permethrin cà MCM-S, a so sensibilità à l'olii PBO è C. verum, A. galanga è C. rotundus hè ligeramente più altu ch'è MCM-S.
Cum'è osservatu in u bioassay di a pupulazione adulta di a cumminazzioni EO-perméthrin, mischi binari di permethrin è EO (LD25) dimustratu sia sinergia (valore SR > 1,05) o nisun effettu (valore SR = 1 ± 0,05).Effetti adulti cumplessi di una mistura di EO-permetrina nantu à i mosquitos albini sperimentali.Aedes aegypti strains MCM-S è PMD-R sò mostrati in a Tabella 4 è a Figura 3. L'addizione di l'oliu C. verum hè stata trovata per riduce ligeramente a LD50 di permethrin contru MCM-S è ligeramente aumentà u LD50 contru PMD-R à 0,44- 0,42 ng/mg in e donne è da 3,70 à 3,85 ng/mg in e donne, rispettivamente.In cuntrastu, l'aghjunzione di C. rotundus è A. galanga olii significativamente riduciutu u LD50 di permethrin in MCM-S da 0,44 à 0,07 (U = 0, Z = -2,309, P = 0,029) è à 0,11 (U = 0)., Z) = -2.309, P = 0.029) ng / mg donne.Basatu nantu à i valori LD50 di MCM-S, i valori SR di a mistura EO-permethrin dopu l'aghjunzione di l'olii C. rotundus è A. galanga eranu 6,28 è 4,00, rispettivamente.In cunsiquenza, u LD50 di permethrin contru PMD-R diminuite significativamente da 3,70 à 0,42 (U = 0, Z = -2,309, P = 0,029) è à 0,003 cù l'aghjunzione di C. rotundus è A. galanga oils (U = 0) ., Z = -2.337, P = 0.029) ng / mg femina.U valore SR di permethrin cumminatu cù C. rotundus contru PMD-R era 8,81, mentri u valore SR di a mistura di galangal-permethrin era 1233,33.Relativamente à MCM-S, u valore LD50 di u cuntrollu pusitivu PBO hè diminuitu da 0,44 à 0,26 ng/mg (femmine) è da 3,70 ng/mg (femmine) à 0,65 ng/mg (U = 0, Z = -2,309, P). = 0,029) è PMD-R (U = 0, Z = -2,309, P = 0,029).I valori SR di a mistura PBO-permetrina per i ceppi MCM-S è PMD-R eranu 1,69 è 5,69, rispettivamente.Questi risultati indicanu chì l'olii di C. rotundus è A. galanga è PBO rinfurzà a toxicità di permetrina in una misura più grande di l'oliu C. verum per i ceppi MCM-S è PMD-R.
Attività di l'adulti (LD50) di EO, PBO, permetrina (PE) è e so cumminzioni contr'à ceppi piretroidi-sensibili (MCM-S) è resistenti (PMD-R) di zanzare Aedes.Aedes aegypti
[45].I piretroidi sintetici sò usati in u mondu per cuntrullà quasi tutti l'artropodi d'impurtanza agricula è medica.Tuttavia, per via di e cunsequenze dannusu di l'usu di insetticidi sintetici, soprattuttu in quantu à u sviluppu è a resistenza generalizata di i mosquitoes, è ancu l'impattu nantu à a salute à longu andà è l'ambiente, ci hè avà un urgente bisognu di riduce l'usu. di insetticidi sintetici tradiziunali è sviluppà alternative [35, 46, 47].In più di prutezzione di l'ambiente è di a salute umana, i vantaghji di l'insecticidi botanichi includenu alta selettività, dispunibilità glubale, è facilità di pruduzzione è di usu, facenu più attrattivi per u cuntrollu di mosquito [32,48, 49].Stu studiu, in più di l'elucidazione di e caratteristiche chimiche di l'olii essenziali efficaci per l'analisi GC-MS, hà ancu valutatu a putenza di l'olii essenziali adulti è a so capacità di rinfurzà a toxicità di permethrin sinteticu.aegypti in ceppi sensibili ai piretroidi (MCM-S) e ceppi resistenti (PMD-R).
A carattarizazione GC-MS hà dimustratu chì cypern (14.04%), β-bisabolene (18.27%) è cinnamaldehyde (64.66%) eranu i cumpunenti principali di l'olii C. rotundus, A. galanga è C. verum, rispettivamente.Questi chimichi anu dimustratu diverse attività biologiche.Ahn et al.[50] hà infurmatu chì 6-acetoxycyperene, isolatu da u rizoma di C. rotundus, agisce cum'è un compostu antitumorale è pò induce l'apoptosi dipendente da caspase in i celluli di u cancer d'ovariu.Le β-bisabolène, extrait de l'huile essentielle de myrrhe, présente une cytotoxicité spécifique contre les cellules tumorales mammaires humaines et de souris in vitro et in vivo [51].Cinnamaldehyde, ottenuta da estratti naturali o sintetizzati in u laboratoriu, hè statu infurmatu per avè attività insetticida, antibacteriale, antifungali, antiinflamatorii, immunomodulatori, anticancer è antiangiogenic [52].
I risultati di u bioassay di l'attività adulta dipendente da a dose anu dimustratu un bonu potenziale di l'EO testati è hà dimustratu chì i ceppi di mosquito Aedes MCM-S è PMD-R anu suscettibilità simili à EO è PBO.Aedes aegypti.Un paragone di l'efficacità di EO è permethrin hà dimustratu chì l'ultime hà un effettu allercidale più forte: i valori LD50 sò 0,44 è 3,70 ng/mg in e femine per i ceppi MCM-S è PMD-R, rispettivamente.Sti scuperti sò sustinuti da parechji studii chì mostranu chì i pesticidi naturali, in particulare i prudutti di e piante, sò generalmente menu efficaci cà i sustanzi sintetici [31, 34, 35, 53, 54].Questu pò esse perchè u primu hè una cumminazione cumplessa di ingredienti attivi o inattivi, mentre chì l'ultimu hè un compostu attivu unicu purificatu.In ogni casu, a diversità è a cumplessità di ingredienti attivi naturali cù diversi miccanismi d'azzione ponu rinfurzà l'attività biologica o impediscenu u sviluppu di resistenza in pupulazioni ospiti [55, 56, 57].Parechji circadori anu signalatu u putenziale anti-mosquito di C. verum, A. galanga è C. rotundus è i so cumpunenti cum'è β-bisabolene, cinnamaldehyde è 1,8-cineole [22, 36, 58, 59, 60,61, 62,63 ,64].In ogni casu, una rivista di a littiratura hà revelatu chì ùn ci sò micca stati rapporti previ di u so effettu sinergicu cù permethrin o altri insetticidi sintetici contr'à i mosquitoes Aedes.Aedes aegypti.
In questu studiu, differenzi significati in a suscettibilità di permethrin sò stati osservati trà i dui ceppi Aedes.Aedes aegypti.MCM-S hè sensibile à permethrin, mentri PMD-R hè assai menu sensibile à questu, cù un tassu di resistenza di 8.41.Comparatu à a sensibilità di MCM-S, PMD-R hè menu sensibile à permethrin ma più sensibile à EO, chì furnisce una basa per più studii destinati à aumentà l'efficacità di permethrin cumminendu cù EO.Un bioassay sinergicu basatu nantu à una combinazione per l'effetti adulti hà dimustratu chì i mischi binari di EO è permetrina riducevanu o aumentanu a mortalità di Aedes adulti.Aedes aegypti.L'addizione di l'oliu C. verum hà diminuitu pocu u LD50 di permethrin contru MCM-S, ma ligeramente aumentatu u LD50 contru PMD-R cù valori SR di 1,05 è 0,96, rispettivamente.Questu indica chì l'oliu C. verum ùn hà micca un effettu sinergicu o antagonisticu nantu à permethrin quandu pruvatu nantu à MCM-S è PMD-R.In cuntrastu, l'olii di C. rotundus è A. galanga anu dimustratu un effettu sinergicu significativu riducendu significativamente i valori LD50 di permethrin in MCM-S o PMD-R.Quandu permethrin hè stata cumminata cù EO di C. rotundus è A. galanga, i valori SR di a mistura EO-permethrin per MCM-S eranu 6.28 è 4.00, rispettivamente.Inoltre, quandu permethrin hè stata evaluata contr'à PMD-R in cumbinazioni cù C. rotundus (SR = 8,81) o A. galanga (SR = 1233,33), i valori SR anu aumentatu significativamente.Hè da nutà chì sia C. rotundus è A. galanga anu aumentatu a toxicità di permethrin contru PMD-R Ae.aegypti significativamente.In listessu modu, PBO hè stata trovata per aumentà a toxicità di permetrina cù valori SR di 1,69 è 5,69 per i ceppi MCM-S è PMD-R, rispettivamente.Siccomu C. rotundus è A. galanga anu avutu i più alti valori di SR, sò stati cunsiderati cum'è i meglii sinergii per rinfurzà a toxicità di permethrin in MCM-S è PMD-R, rispettivamente.
Diversi studii precedenti anu riportatu l'effettu sinergicu di cumminazzioni di insetticidi sintetici è estratti vegetali contru diverse spezie di mosquito.Un bioassay larvicida contr'à Anopheles Stephensi studiatu da Kalayanasundaram è Das [65] hà dimustratu chì u fenthion, un organofosfatatu à spettru largu, era assuciatu cù Cleodendron inerme, Pedalium murax è Parthenium hysterophorus.Una sinergia significativa hè stata osservata trà l'estratti cù un effettu sinergicu (SF) di 1.31., 1.38, 1.40, 1.48, 1.61 è 2.23, rispettivamente.In un screening larvicida di 15 spezie di mangrove, l'estrattu di l'etere di petroliu di e radici di mangrove hè statu più efficace contr'à Culex quinquefasciatus cun un valore LC50 di 25,7 mg/L [66].L'effettu sinergicu di questu extracte è u pyrethrum insecticida botanicu hè statu ancu infurmatu per riduce u LC50 di pyrethrum contru C. quinquefasciatus larvae da 0,132 mg / L à 0,107 mg / L, in più, un calculu SF di 1,23 hè stata utilizata in stu studiu.34,35,44].L'efficacità cumminata di l'estratto di radice di citron Solanum è parechji insetticidi sintetici (per esempiu, fenthion, cypermethrin (un piretroide sinteticu) è timethphos (un larvicida organofosforu)) contru i mosquitoes Anopheles hè stata evaluata.Stephensi [54] è C. quinquefasciatus [34].L'usu cumminatu di a cipermetrina è l'estrattu di etere di petroliu di frutti gialli hà dimustratu un effettu sinergicu nantu à a cipermetrina in tutti i rapporti.U rapportu più efficau era a combinazione binaria 1: 1 cù i valori LC50 è SF di 0,0054 ppm è 6,83, rispettivamente, relative à An.Stephen West [54].Mentre chì una mistura binaria 1: 1 di S. xanthocarpum è temephos era antagonista (SF = 0.6406), a cumminazzioni S. xanthocarpum-fenthion (1: 1) mostrava l'attività sinergica contr'à C. quinquefasciatus cun un SF di 1.3125 [34].Tong è Blomquist [35] anu studiatu l'effetti di l'oxidu di etilene vegetale nantu à a toxicità di carbaryl (un carbamate di spettru largu) è permethrin à i mosquitoes Aedes.Aedes aegypti.I risultati anu dimustratu chì l'oxidu d'etilene da l'agar, u pepite neru, u ginepro, l'helichrysum, u sandalo è u sesame anu aumentatu a toxicità di carbaryl à i mosquitoes Aedes.aegypti i valori SR di larva varianu da 1,0 à 7,0.In cuntrastu, nimu di l'EO era tossicu per i mosquitoes Aedes adulti.À questu stadiu, ùn sò stati signalati effetti sinergici per a cumminazzioni di Aedes aegypti è EO-carbaryl.PBO hè stata utilizata cum'è un cuntrollu pusitivu per rinfurzà a toxicità di carbaryl contru i mosquitos Aedes.I valori SR di larva di Aedes aegypti è adulti sò 4,9-9,5 è 2,3, rispettivamente.Solu mischi binari di permetrina è EO o PBO sò stati pruvati per l'attività larvicida.U mischju di EO-permetrina hà avutu un effettu antagonistu, mentri a mistura di PBO-permetrina hà avutu un effettu sinergicu contru i mosquitos Aedes.Larve di Aedes aegypti.Tuttavia, l'esperimenti di risposta di dose è a valutazione SR per e miscele di PBO-permetrina ùn sò ancu stati realizati.Ancu s'è pochi risultati sò stati ottenuti in quantu à l'effetti sinergichi di e cumminzioni fitosintetiche contr'à i vettori di mosquito, sti dati sustenenu i risultati esistenti, chì aprenu a pruspettiva di aghjunghje sinergisti micca solu per riduce a dosa applicata, ma ancu per aumentà l'effettu di morte.Efficienza di l'insetti.Inoltre, i risultati di stu studiu dimustratu per a prima volta chì l'olii di C. rotundus è A. galanga esercanu sinergicamente una efficacità significativamente più altu contru i ceppi suscettibili à i piretroidi è resistenti à i piretroidi di mosquitoes Aedes cumparatu cù PBO quandu sò cumminati cù a toxicità di permetrina.Aedes aegypti.In ogni casu, i risultati inespettati di l'analisi sinergicu dimustranu chì l'oliu di C. verum hà avutu a più grande attività anti-adultu contr'à i dui ceppi Aedes.Sorprendentemente, l'effettu tossicu di permethrin nantu à Aedes aegypti era insatisfactory.Variazioni in effetti tossichi è effetti sinergichi pò esse dovutu in parte à l'esposizione à diversi tipi è livelli di cumpunenti bioattivi in ​​questi olii.
Malgradu i sforzi per capisce cumu migliurà l'efficienza, i miccanismi sinergichi restanu micca chjaru.I pussibuli ragiuni per a sferente efficacità è u putenziale sinergicu ponu include differenzi in a cumpusizioni chimica di i prudutti testati è differenze in a suscettibilità di mosquito assuciata à u statutu di resistenza è u sviluppu.Ci sò diffirenzii trà i cumpunenti di l'ossidu di etilene maiò è minori pruvati in stu studiu, è certi di sti cumposti sò stati dimustrati per avè effetti repellenti è tossichi contru una varietà di pesti è vettori di malatie [61,62,64,67,68].In ogni casu, i cumposti principali carattarizati in l'olii di C. rotundus, A. galanga è C. verum, cum'è cypern, β-bisabolene è cinnamaldehyde, ùn sò micca stati pruvati in questu documentu per i so attività anti-adulti è synergistic contru Ae, rispettivamente.Aedes aegypti.Dunque, studii futuri sò necessarii per isolà l'ingredienti attivi presenti in ogni oliu essenziale è elucidate a so efficacità insetticida è l'interazzione sinergica contr'à stu vettore di mosquito.In generale, l'attività insecticida dipende da l'azzione è a reazione trà i veleni è i tessuti di l'insetti, chì ponu esse simplificati è divisi in trè tappe: penetrazione in a pelle di u corpu di l'insetti è membrani di l'urgani di destinazione, attivazione (= interazzione cù u mira) è disintossicazione.sustanzi tossichi [57, 69].Per quessa, u sinergismu di l'insecticida chì risultatu in una efficacità aumentata di e cumminazzioni di toxicanti richiede almenu una di queste categurie, cum'è una penetrazione aumentata, una attivazione più grande di cumposti accumulati, o una desintoxicazione menu ridutta di l'ingredientu attivu pesticidi.Per esempiu, a tolleranza di l'energia ritarda a penetrazione di a cuticule à traversu una cuticule ingrossata è a resistenza biochimica, cum'è u metabolismu insecticida rinfurzatu osservatu in certi ceppi d'insetti resistenti [70, 71].L'efficacità significativa di l'EO in l'aumentu di a toxicità di permethrin, in particulare contr'à PMD-R, pò indicà una suluzione à u prublema di a resistenza à l'insecticida interagisce cù i miccanismi di resistenza [57, 69, 70, 71].Tong è Blomquist [35] sustenevanu i risultati di stu studiu dimustrendu una interazione sinergica trà EO è pesticidi sintetici.aegypti, ci hè evidenza di l'attività inhibitoria contr'à l'enzimi disintossicanti, cumpresi cytochrome P450 monooxygenases è carboxylesterases, chì sò strettamente assuciati cù u sviluppu di resistenza à i pesticidi tradiziunali.PBO ùn hè micca solu dettu chì hè un inhibitore metabolicu di a citocromu P450 monooxygenase, ma ancu migliurà a penetrazione di l'insecticidi, cum'è dimustratu da u so usu cum'è un cuntrollu pusitivu in studii sinergichi [35, 72].Curiosamente, 1,8-cineole, unu di i cumpunenti impurtanti truvati in l'oliu di galanga, hè cunnisciutu per i so effetti tossichi nantu à e spezie d'insetti [22, 63, 73] è hè statu infurmatu per avè effetti sinergichi in parechji spazii di ricerca di l'attività biologica. 74]..,75,76,77].Inoltre, 1,8-cineole in cumbinazioni cù diverse droghe cumpresi curcumin [78], 5-fluorouracil [79], mefenamic acid [80] è zidovudine [81] hà ancu un effettu di prumove a permeazione.in vitro.Cusì, u rolu pussibile di 1,8-cineole in l'azzione insetticida sinergica ùn hè micca solu cum'è ingredientu attivu, ma ancu com'è un rinforzu di penetrazione.A causa di una sinergia più grande cù permethrin, in particulare contr'à PMD-R, l'effetti sinergichi di l'oliu di galanga è l'oliu di trichosanthes osservati in stu studiu pò esse risultatu da interazzione cù i miccanismi di resistenza, vale à dì una permeabilità aumentata à u cloru.I piretroidi aumentanu l'attivazione di i cumposti accumulati è inibiscenu l'enzimi disintossicanti, cum'è cytochrome P450 monooxygenases è carboxylesterases.In ogni casu, questi aspetti necessitanu più studiu per elucidare u rolu specificu di l'EO è i so composti isolati (solu o in cumminazione) in i miccanismi sinergichi.
In u 1977, l'aumentu di i livelli di resistenza à permethrin sò stati rappurtati in i principali populazioni vettoriali in Tailanda, è in i decennii successivi, l'usu di permethrin hè statu largamente rimpiazzatu da altri chimichi piretroidi, in particulare quelli rimpiazzati da deltametrina [82].In ogni casu, a resistenza di u vettore à a deltametrina è altre classi di insetticidi hè estremamente cumuni in tuttu u paese per via di l'usu eccessivu è persistente [14, 17, 83, 84, 85, 86].Per cumbatte stu prublema, hè cunsigliatu di rotà o riutilizà pesticidi scartati chì eranu prima efficaci è menu tossichi per i mammiferi, cum'è permethrin.Attualmente, ancu s'è l'usu di permethrin hè stata ridutta in i recenti prugrammi di cuntrollu di mosquito di u guvernu naziunale, a resistenza di permethrin pò ancu esse truvata in e populazioni di mosquito.Questu pò esse dovutu à l'esposizione di i mosquitoes à i prudutti di cuntrollu di pesti domestici cummirciali, chì sò principalmente custituiti da permetrina è altri piretroidi [14, 17].Cusì, a repurposing successu di permethrin richiede u sviluppu è l'implementazione di strategie per riduce a resistenza di u vettore.Ancu s'ellu nimu di l'olii essenziali pruvati individualmente in stu studiu era efficau cum'è permethrin, u travagliu inseme cù permethrin hà risultatu in effetti sinergichi impressiunanti.Il s'agit d'un signe prometteur que l'interaction de l'EO avec les mécanismes de résistance résulte en la combinaison de permethrine et d'EO plus efficace que l'insecticide ou l'EO seul, en particulier contre PMD-R Ae.Aedes aegypti.I benefizii di i mischi sinergichi in l'aumentu di l'efficacità, malgradu l'usu di dosi più bassi per u cuntrollu di u vettore, ponu purtà à una gestione di resistenza mejorata è costi ridotti [33, 87].Da questi risultati, hè piacevule à nutà chì l'EO di A. galanga è C. rotundus eranu significativamente più efficaci di PBO in sinergia di a toxicità di permetrina in i ceppi MCM-S è PMD-R è sò una alternativa potenziale à l'aiuti ergogenichi tradiziunali.
L'EO selezziunati avianu effetti sinergici significativi in ​​a rinfurzà a toxicità adulta contr'à PMD-R Ae.aegypti, in particulare l'oliu di galanga, hà un valore SR di finu à 1233,33, chì indicanu chì l'EO hà una prumessa larga cum'è sinergistu per rinfurzà l'efficacità di permethrin.Questu pò stimulà l'usu di un novu pruduttu naturali attivu, chì inseme puderia aumentà l'usu di prudutti di cuntrollu di mosquito altamente efficace.Revela ancu u putenziale di l'ossidu di etilene cum'è un sinergistu alternativu per migliurà efficacemente l'insetticidi più vechji o tradiziunali per affruntà i prublemi di resistenza esistenti in e populazioni di mosquito.L'usu di e piante facilmente dispunibili in i prugrammi di cuntrollu di mosquito ùn solu riduce a dependenza di materiali impurtati è caru, ma ancu stimula i sforzi lucali per rinfurzà i sistemi di salute publica.
Questi risultati mostranu chjaramente l'effettu sinergicu significativu pruduciutu da a cumminazzioni di l'ossidu di etilene è permethrin.I risultati mette in risaltu u putenziale di l'oxidu d'etilene cum'è un sinergistu di a pianta in u cuntrollu di mosquito, aumentendu l'efficacità di permethrin contru i mosquitoes, in particulare in populazioni resistenti.I sviluppi futuri è a ricerca necessitaranu bioanalisi sinergicu di l'olii di galanga è alpinia è i so cumposti isolati, cumminazzioni di insetticidi d'origine naturali o sintetica contr'à parechje spezie è fasi di mosquitoes, è teste di toxicità contr'à l'organisimi non-target.L'usu praticu di l'ossidu di etilene cum'è un sinergicu alternativu viable.
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