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Attività larvicida è antitermitica di biosurfactants microbiani pruduciuti da Enterobacter cloacae SJ2 isolatu da a spugna Clathria sp.

L'usu generalizatu di pesticidi sintetici hà purtatu à parechji prublemi, cumprese l'emergenza di organismi resistenti, degradazione ambientale è dannu à a salute umana.Dunque, novu microbialpesticidichì sò sicuri per a salute umana è l'ambiente sò urgentemente necessarii.In questu studiu, u biosurfactant rhamnolipid pruduttu da Enterobacter cloacae SJ2 hè stata utilizata per valutà a toxicità à e larve di mosquito (Culex quinquefasciatus) è termite (Odontotermes obesus).I risultati anu dimustratu chì ci era una rata di mortalità dipendente da a dosa trà i trattamenti.U valore LC50 (50% concentrazione letale) à 48 ore per i biosurfactants larvali di termite è mosquito hè statu determinatu utilizendu un metudu di adattazione di curva di regressione non lineare.I risultati anu dimustratu chì i valori LC50 di 48 ore (intervallu di cunfidenza 95%) di l'attività larvicida è antitermitica di u biosurfactant eranu 26,49 mg / L (range 25,40 à 27,57) è 33,43 mg / L (range 31,09 à 35,68) rispettivamente.Sicondu l'esame istopatologicu, u trattamentu cù biosurfactants hà causatu danni severi à i tessuti organelle di larva è termite.I risultati di stu studiu indicanu chì u biosurfactant microbiale pruduciutu da Enterobacter cloacae SJ2 hè un strumentu eccellente è potenzalmentu efficace per u cuntrollu di Cx.quinquefasciatus è O. obesus.
I paesi tropicali sperimentanu un gran numaru di malatie trasmesse da mosquito1.A rilevanza di e malatie trasmesse da mosquito hè generalizata.Più di 400 000 persone mori da a malaria ogni annu, è alcune cità maiò sò soffrendu epidemie di malatie gravi cum'è dengue, febbre gialla, chikungunya è Zika.2 E malatie vettoriali sò assuciate cù una in sei infizzioni in u mondu sanu, cù i mosquitoes chì causanu u più. casi significativu3,4.Culex, Anopheles è Aedes sò i trè generi di zanzara più cumunimenti assuciati cù a trasmissione di e malatie5.A prevalenza di a febbre dengue, una infezzjoni trasmessa da u mosquito Aedes aegypti, hè aumentata in l'ultima decada è pone una minaccia significativa per a salute publica4,7,8.Sicondu l'Organizazione Mondiale di a Salute (OMS), più di u 40% di a pupulazione mundiale hè in risicu di febbre dengue, cù 50-100 milioni di novi casi annu in più di 100 paesi9,10,11.A febbre Dengue hè diventata un prublema maiò di salute publica postu chì a so incidenza hè aumentata in u mondu12,13,14.Anopheles gambiae, cumunimenti cunnisciutu cum'è u mosquito Anopheles africanu, hè u vettore più impurtante di malaria umana in e regioni tropicali è subtropicali15.U virus di u Nilu Occidentale, l'encefalite di San Luigi, l'encefalite giapponese è l'infizzioni virali di cavalli è uccelli sò trasmessi da i mosquitoes Culex, spessu chjamati mosquitoes di casa cumuni.Inoltre, sò ancu purtatori di malatie bacteriale è parassitarie16.Ci sò più di 3 000 spezie di termiti in u mondu, è sò stati intornu per più di 150 milioni d'anni17.A maiò parte di e pesti campanu in u tarrenu è si alimentanu di lignu è prudutti di lignu chì cuntenenu cellulosa.A termite indiana Odontotermes obesus hè una pesta impurtante chì causa danni severi à i culturi impurtanti è l'arburi di piantazioni18.In i zoni agriculi, l'infestazioni di termite in diverse tappe ponu causà enormi danni ecunomichi à parechji culturi, spezie d'arburi è materiali di custruzzione.I termiti ponu ancu causà prublemi di salute umana19.
U prublema di a resistenza di i microorganismi è i pesti in i campi farmaceutichi è agriculi d'oghje hè cumplessu20,21.Per quessa, e duie cumpagnie anu da circà novi antimicrobiali efficaci in u costu è biopesticidi sicuri.I pesticidi sintetici sò avà dispunibuli è sò stati dimustrati chì sò infettivi è repellenu insetti benifichi senza mira22.Nta l'ultimi anni, a ricerca nantu à i biosurfactants hà sviluppatu per via di a so applicazione in diverse industrii.I biosurfactants sò assai utili è vitali in l'agricultura, a remediazione di a terra, l'estrazione di petroliu, a rimozione di battìri è insetti, è a trasfurmazioni alimentari23,24.I biosurfactants o i surfactants microbiani sò sustanzi chimichi biosurfactant pruduciuti da i microorganismi cum'è batteri, lieviti è fungi in l'abitati custieri è i spazii contaminati da l'oliu25,26.Surfactants derivati ​​chimicamente è biosurfactants sò dui tipi chì sò ottenuti direttamente da l'ambienti naturali27.Diversi biosurfactants sò ottenuti da l'abitati marini28,29.Dunque, i scientisti cercanu novi tecnulugii per a produzzione di biosurfactants basati in batteri naturali30,31.Avanzate in tali ricerche dimustranu l'impurtanza di questi composti biologichi per a prutezzione di l'ambiente32.Bacillus, Pseudomonas, Rhodococcus, Alcaligenes, Corynebacterium è questi generi bacteriali sò rapprisentanti ben studiati23,33.
Ci sò parechji tippi di biosurfactants cù una larga gamma di applicazioni34.Un vantaghju significativu di sti cumposti hè chì alcuni di elli anu attività antibacteriana, larvicida è insecticida.Questu significa chì ponu esse aduprati in l'industria agricula, chimica, farmaceutica è cosmetica35,36,37,38.Perchè i biosurfactants sò generalmente biodegradabili è benefizii per l'ambiente, sò usati in prugrammi integrati di gestione di pesti per prutege i culturi39.Cusì, a cunniscenza basica hè stata ottenuta nantu à l'attività larvicida è antitermitica di i biosurfactants microbiani pruduciuti da Enterobacter cloacae SJ2.Avemu esaminatu a mortalità è i cambiamenti istologichi quandu sò esposti à diverse concentrazioni di biosurfactants ramnolipidi.Inoltre, avemu evaluatu u prugramma di computer Structure-Attività Quantitative (QSAR) largamente utilizatu Ecological Structure-Activity (ECOSAR) per determinà a toxicità aguda per microalgae, daphnia è pesci.
In stu studiu, l'attività antitermite (tossicità) di i biosurfactants purificati in diverse concentrazioni chì varieghja da 30 à 50 mg / ml (à intervalli di 5 mg / ml) hè stata pruvata contr'à termite indiana, O. obesus è quarta spezia )Evaluate.Larve di l'instar Cx.Larve di zanzara quinquefasciatus.Biosurfactant LC50 concentrazioni nantu à 48 ore contr'à O. obesus è Cx.C. solanacearum.E larve di mosquito sò state identificate cù un metudu di adattazione di curva di regressione non lineare.I risultati anu dimustratu chì a mortalità di termite aumentava cù l'aumentu di a concentrazione di biosurfactant.I risultati anu dimustratu chì u biosurfactant avia attività larvicida (Figura 1) è attività anti-termite (Figura 2), cù valori LC50 di 48 ore (95% CI) di 26,49 mg/L (25,40 à 27,57) è 33,43 mg/ l (Fig. 31.09 à 35.68), rispettivamente (Table 1).In termini di tossicità acuta (48 ore), u biosurfactant hè classificatu cum'è "dannusu" per l'organismi pruvati.U biosurfactant pruduciutu in stu studiu hà dimustratu una eccellente attività larvicida cù 100% di mortalità in 24-48 ore di esposizione.
Calculate u valore LC50 per l'attività larvicida.Curve di regressione non lineare adattazione (linea solida) è intervallu di cunfidenza 95% (area ombreggiata) per a mortalità relativa (%).
Calculate u valore LC50 per l'attività anti-termite.Curve di regressione non lineare adattazione (linea solida) è intervallu di cunfidenza 95% (area ombreggiata) per a mortalità relativa (%).
À a fine di l'esperimentu, i cambiamenti morfologichi è anomalii sò stati osservati sottu u microscope.I cambiamenti morfologichi sò stati osservati in i gruppi di cuntrollu è trattati à 40x magnification.Cum'è mostra in a Figura 3, l'impurtanza di crescita hè accaduta in a maiò parte di e larve trattate cù biosurfactants.Figura 3a mostra un Cx normale.quinquefasciatus, a Figura 3b mostra un Cx anomalu.Causa cinque larve di nematodi.
Effettu di dosi subletali (LC50) di biosurfactants nantu à u sviluppu di larva di Culex quinquefasciatus.Immagine di microscopia luminosa (a) di un Cx normale a ingrandimento 40×.quinquefasciatus (b) Cx anormale.Causa cinque larve di nematodi.
In u presente studiu, l'esame histologicu di e larve trattate (Fig. 4) è termites (Fig. 5) palesanu parechje anormalità, cumpresa a riduzzione in l'area abdominal è danni à i musculi, i capi epiteliali è a pelle.midgut.L'istologia hà revelatu u mecanismu di l'attività inhibitoria di u biosurfactant utilizatu in stu studiu.
Histopatologia di larva Cx normale di 4th instar senza trattamentu.quinquefasciatus larvae (control: (a,b)) è trattatu cù biosurfactant (trattamentu: (c,d)).Le frecce indicano l'epitelio intestinale trattato (epi), i nuclei (n) e i muscoli (mu).Bar = 50 µm.
Histopatologia di O. obesus senza trattamentu normale (cuntrollu: (a, b)) è trattatu biosurfactant (trattamentu: (c, d)).Le frecce indicano rispettivamente l'epitelio intestinale (epi) e il muscolo (mu).Bar = 50 µm.
In questu studiu, ECOSAR hè stata utilizata per predichendu a toxicità aguda di i prudutti di biosurfactant rhamnolipid à i pruduttori primari (alga verde), i cunsumatori primari (pulci d'acqua) è i cunsumatori secundari (pesci).Stu prugramma usa mudelli sofisticati di cumposti di struttura-attività quantitativa per valutà a toxicità basatu nantu à a struttura moleculare.U mudellu usa un software di struttura-attività (SAR) per calculà a toxicità aguda è à longu andà di sustanzi à spezie acquatiche.In particulare, a Tabella 2 riassume a cuncentrazione letale media stimata (LC50) è a cuncentrazione effettiva media (EC50) per parechje spezie.A sospetta toxicità hè stata categurizzata in quattru livelli cù u Sistema Armonizatu Globale di Classificazione è Etichettatura di Sustanze Chimiche (Table 3).
U cuntrollu di e malatie vettoriali, in particulare i ceppi di mosquitoes è Aedes mosquitoes.Egiziani, avà travagliu difficiule 40,41,42,43,44,45,46.Ancu se certi pesticidi chimicamenti dispunibili, cum'è i piretroidi è l'organofosfati, sò un pocu benefica, ponenu risichi significativi per a salute umana, cumprese a diabetes, i disordini riproduttivi, i disordini neurologichi, u cancer è e malatie respiratorie.Inoltre, cù u tempu, sti insetti ponu esse resistenti à elli13,43,48.Cusì, e misure di cuntrollu biologicu efficaci è amichevuli di l'ambiente diventeranu un metudu più populari di cuntrollu di mosquito49,50.Benelli51 suggerì chì u cuntrollu precoce di i vettori di mosquito seria più efficaci in i zoni urbani, ma ùn anu micca cunsigliatu l'usu di larvicidi in i zoni rurali52.Tom et al 53 hà ancu suggeritu chì u cuntrollu di i mosquitoes in i so stadi immaturi seria una strategia sicura è simplice perchè sò più sensittivi à l'agenti di cuntrollu 54 .
A produzzione di biosurfactant da una ceppa potente (Enterobacter cloacae SJ2) dimustrava una efficacità consistente è promettente.U nostru studiu precedente hà dettu chì Enterobacter cloacae SJ2 ottimizeghja a produzzione di biosurfactant utilizendu parametri fisicochimici26.Sicondu u so studiu, e cundizioni ottimali per a produzzione di biosurfactant da un putenziale isolatu di E. cloacae eranu incubazione per 36 ore, agitazione à 150 rpm, pH 7,5, 37 ° C, salinità 1 ppt, 2% glucose cum'è fonte di carbone, 1% levitu. .l'estrattu hè stata utilizata com'è fonte di nitrogenu per ottene 2,61 g / L di biosurfactant.Inoltre, i biosurfactants sò stati carattarizati cù TLC, FTIR è MALDI-TOF-MS.Questu hà cunfirmatu chì rhamnolipid hè un biosurfactant.I biosurfactants glicolipidi sò a classa più studiata di altri tipi di biosurfactants55.Sò custituiti da parti di carbuidrati è lipidi, principarmenti catene di acidi grassi.Trà i glicolipidi, i principali rapprisentanti sò ramnolipid è sophorolipid56.I ramnolipidi cuntenenu dui frati di ramnose ligati à l'acidu mono- o di-β-hydroxydecanoic 57 .L'usu di ramnolipidi in l'industria medica è farmaceutica hè ben stabilitu 58 , in più di u so usu recente cum'è pesticidi 59 .
L'interazzione di u biosurfactant cù a regione idrofobica di u sifone respiratoriu permette à l'acqua di passà per a so cavità stomatica, aumentendu cusì u cuntattu di e larva cù l'ambiente acquaticu.A prisenza di biosurfactants affetta ancu a trachea, a durata di quale hè vicinu à a superficia, chì face più faciule per i larvati per arrampicà à a superficia è respira.In u risultatu, a tensione superficiale di l'acqua diminuisce.Siccomu i larvati ùn ponu micca attaccà à a superficia di l'acqua, cascanu à u fondu di u tank, disrupting pressure hydrostatic, resulting in expensive energy expenditure and death by drowning38,60.I risultati simili sò stati ottenuti da Ghribi61, induve un biosurfactant pruduciutu da Bacillus subtilis mostrava attività larvicida contru Ephestia kuehniella.In listessu modu, l'attività larvicida di Cx.Das è Mukherjee23 anu ancu evaluatu l'effettu di lipopeptidi ciclichi nantu à e larva di quinquefasciatus.
I risultati di stu studiu riguardanu l'attività larvicida di i biosurfactants ramnolipids contru Cx.L'assassiniu di i mosquitoes quinquefasciatus hè coherente cù i risultati publicati prima.Per esempiu, surfactin-based biosurfactants prudutte da diversi batteri di u genus Bacillus sò usati.è Pseudomonas spp.Alcuni primi rapporti64,65,66 anu riportatu l'attività di uccisione di larva di i biosurfactants lipopeptidi da Bacillus subtilis23.Deepali et al.63 hà truvatu chì u biosurfactant rhamnolipid isolatu da Stenotropomonas maltophilia avia una potente attività larvicida à una cuncentrazione di 10 mg/L.Silva et al.67 hà riportatu l'attività larvicida di u biosurfactant rhamnolipid contr'à Ae à una cuncentrazione di 1 g / L.Aedes aegypti.Kanakdande et al.68 hà riportatu chì i biosurfactants lipopeptidi pruduciuti da Bacillus subtilis causavanu a mortalità generale in larva di Culex è termiti cù a frazione lipofila di Eucalyptus.De même, Masendra et al.69 rapportatu formica travagliadori (Cryptotermes cynocephalus Light.) Mortalità di 61,7% in u lipophilic n -hexane è Fractions EtOAc di E. estratto crudo.
Parthipan et al 70 anu riportatu l'usu insecticida di biosurfactants lipopeptidi pruduciutu da Bacillus subtilis A1 è Pseudomonas stutzeri NA3 contru Anopheles Stephensi, un vettore di u parassita di malaria Plasmodium.Anu osservatu chì e larve è pupe sopravvivevanu più longu, avianu periodi di oviposizione più brevi, eranu sterili, è avianu una vita più corta quandu trattati cù diverse concentrazioni di biosurfactants.I valori LC50 osservati di B. subtilis biosurfactant A1 eranu 3.58, 4.92, 5.37, 7.10 è 7.99 mg/L per diversi stati larvali (vale à dì larva I, II, III, IV è stadi pupae) rispettivamente.In paragone, i biosurfactants per i stadi larvali I-IV è i stadi pupali di Pseudomonas stutzeri NA3 eranu 2,61, 3,68, 4,48, 5,55 è 6,99 mg/L, rispettivamente.A fenologia ritardata di e larve è pupe sopravviventi hè pensata per esse u risultatu di disturbi fisiologichi è metabolichi significativi causati da trattamenti insetticidi71.
A ceppa CCMA 0358 di Wickerhamomyces anomalus produce un biosurfactant cun attività larvicida 100% contru i mosquitoes Aedes.aegypti l'intervallu di 24 ore 38 era più altu di quellu rapportatu da Silva et al.Un biosurfactant pruduciutu da Pseudomonas aeruginosa cù l'oliu di girasole cum'è fonte di carbone hè statu dimustratu per tumbà u 100% di e larve in 48 ore 67 .Abinaya et al.72 è Pradhan et al.73 anu ancu dimustratu l'effetti larvicidi o insetticidi di i surfactants pruduciuti da parechji isolati di u genus Bacillus.Un studiu publicatu prima da Senthil-Nathan et al.truvò chì u 100% di e larve di mosquito esposti à e lagune di e piante eranu probabili di more.74.
A valutazione di l'effetti subletali di l'insetticidi nantu à a biologia di l'insetti hè critica per i prugrammi integrati di gestione di pesti perchè e dosi / cuncentrazioni subletali ùn uccidenu l'insetti, ma ponu riduce a pupulazione d'insetti in e generazioni future perturbendu e caratteristiche biologiche10.Siqueira et al 75 anu osservatu l'attività larvicida cumpleta (100% di mortalità) di biosurfactant ramnolipid (300 mg/ml) quandu anu pruvatu à diverse concentrazioni chì varienu da 50 à 300 mg/ml.Stadio larvale di ceppi di Aedes aegypti.Anu analizatu l'effetti di u tempu à a morte è a cuncentrazione subletali nantu à a sopravvivenza di larva è l'attività di natazione.Inoltre, anu osservatu una diminuzione di a velocità di natazione dopu à 24-48 ore di esposizione à concentrazioni subletali di biosurfactant (per esempiu, 50 mg / mL è 100 mg / mL).I veleni chì anu un rolu subletali promettenti sò pensati per esse più efficaci à causà danni multiplici à i pesti esposti76.
L'osservazioni istologichi di i nostri risultati indicanu chì i biosurfactants pruduciuti da Enterobacter cloacae SJ2 alteranu significativamente i tissuti di larva di mosquito (Cx. quinquefasciatus) è termite (O. obesus).Anomali simili sò stati causati da preparazione di l'oliu di basilica in An.gambiaes.s è An.arabica sò stati descritti da Ochola77.Kamaraj et al.78 hà ancu descrittu a stessa anormalità morfologica in An.E larva di Stephanie sò stati esposti à nanoparticule d'oru.Vasantha-Srinivasan et al.79 anu ancu infurmatu chì l'oliu essenziale di a borsa di pastore hà dannighjatu severamente a camera è i strati epiteliali di Aedes albopictus.Aedes aegypti.Raghavendran et al hà dettu chì e larve di mosquito sò stati trattati cù 500 mg / ml di extracte miceliale di un fungus Penicillium lucale.Ae mostra danni histologici severi.aegypti è Cx.Tasso di mortalità 80. Previously, Abinaya et al.E larve di u quartu instar di An sò state studiate.Stephensi è Ae.aegypti truvaru numerosi cambiamenti istologici in Aedes aegypti trattati cù exopolysaccharides B. licheniformis, cumpresu cecum gastricu, atrofia musculare, danni è disorganizazione di ganglia di cordone nervoso72.Sicondu Raghavendran et al., dopu à u trattamentu cù l'extract miceliale di P. daleae, i celi midgut di i mosquitoes pruvati (4th instar larvae) dimustranu inzucchendu di u lumen intestinali, una diminuzione di u cuntenutu intercellulare è a degenerazione nucleare81.I stessi cambiamenti histologichi sò stati osservati in larva di mosquito trattati cù extracte di foglia di echinacea, chì indicanu u putenziale insecticida di i composti trattati50.
L'usu di u software ECOSAR hà ricevutu ricunniscenza internaziunale82.A ricerca attuale suggerisce chì a toxicità acuta di i biosurfactants ECOSAR à i microalgae (C. vulgaris), i pesci è i pulci d'acqua (D. magna) entra in a categuria di "toxicità" definita da e Nazioni Unite83.U mudellu di ecotossicità ECOSAR usa SAR è QSAR per predichendu a toxicità aguda è à longu andà di sustanzi è hè spessu usatu per predice a toxicità di i contaminanti organici82,84.
Paraformaldehyde, sodium phosphate buffer (pH 7.4) è tutti l'altri sustanzi chimichi utilizati in stu studiu sò stati acquistati da HiMedia Laboratories, India.
A produzzione di biosurfactant hè stata realizata in fiaschi Erlenmeyer da 500 mL chì cuntenenu 200 mL di mediu sterile Bushnell Haas supplementatu cù 1% di oliu crudu cum'è l'unica fonte di carbone.Una precultura di Enterobacter cloacae SJ2 (1,4 × 104 CFU/ml) hè stata inoculata è cultivata in un agitatore orbitale à 37 ° C, 200 rpm per 7 ghjorni.Dopu u periodu d'incubazione, u biosurfactant hè stata estratta centrifughendu u mediu di cultura à 3400 × g per 20 min à 4 ° C è u supernatant resultante hè stata utilizata per scopi di screening.I prucessi di ottimisazione è a carattarizazione di i biosurfactants sò stati aduttati da u nostru studiu precedente26.
E larve di Culex quinquefasciatus sò state ottenute da u Center for Advanced Study in Marine Biology (CAS), Palanchipetai, Tamil Nadu (India).E larve sò stati allevati in cuntenituri di plastica pienu d'acqua deionizzata à 27 ± 2 ° C è un fotoperiodu di 12: 12 (luce: scuru).E larve di mosquito sò stati alimentati cù una suluzione di glucose 10%.
Les larves de Culex quinquefasciatus ont été trouvées dans des fosses septiques ouvertes et non protégées.Aduprate linee di classificazione standard per identificà è cultivà e larve in u laboratoriu85.I prucessi larvicidi sò stati realizati in cunfurmità cù i cunsiglii di l'Organizazione Mundiale di a Salute 86 .SH.Larva di quartu instar di quinquefasciatus sò stati cullati in tubi chjusi in gruppi di 25 ml è 50 ml cù un spaziu di l'aire di dui terzi di a so capacità.U biosurfactant (0-50 mg / ml) hè statu aghjuntu à ogni tubu individualmente è almacenatu à 25 ° C.U tubu di cuntrollu usava solu acqua distillata (50 ml).I larvati morti eranu cunsiderati cum'è quelli chì ùn anu micca signalatu di natari durante u periodu di incubazione (12-48 ore) 87 .Calcule u percentualità di a mortalità di larva cù l'equazioni.(1)88.
A famiglia Odontotermitidae include u termite indianu Odontotermes obesus, chì si trova in i tronchi in putrefazione in u Campus Agricultural (Università Annamalai, India).Pruvate stu biosurfactant (0-50 mg/ml) cù e prucedure normali per determinà s'ellu hè dannusu.Dopu l'asciugatura in u flussu di l'aria laminar per 30 min, ogni striscia di carta Whatman hè stata rivestita cù biosurfactant à una cuncentrazione di 30, 40 o 50 mg / ml.Strisce di carta pre-coated è uncoated sò stati pruvati è paragunati in u centru di una piastra Petri.Ogni piastra di Petri cuntene una trentina di termiti attivi O. obesus.I termiti di cuntrollu è di prova sò stati dati carta umida cum'è fonte di alimentazione.Tutti i platti sò stati mantinuti à a temperatura di l'ambienti in tuttu u periodu di incubazione.I termiti sò morti dopu à 12, 24, 36 è 48 ore89,90.L'equazione 1 hè stata aduprata per stimà u percentualità di a mortalità di termite à diverse concentrazioni di biosurfactant.(2).
I campioni sò stati guardati nantu à u ghjacciu è imballati in microtubi chì cuntenenu 100 ml di buffer di fosfatatu di sodiu 0,1 M (pH 7,4) è mandati à u Laboratoriu Centrale di Patologia di l'Aquaculture (CAPL) di u Rajiv Gandhi Center for Aquaculture (RGCA).Laboratoriu d'istologia, Sirkali, Mayiladuthurai.District, Tamil Nadu, India per più analisi.I campioni sò stati immediatamente fissati in 4% paraformaldehyde à 37 ° C per 48 ore.
Dopu à a fase di fissazione, u materiale hè stata lavata trè volte cù tampone di fosfatatu di sodiu 0,1 M (pH 7,4), disidratatu gradualmente in etanol è imbiccu in resina LEICA per 7 ghjorni.A sustanza hè poi posta in un moldu di plastica pienu di resina è polimerizzante, è poi mette in un fornu calatu à 37 ° C finu à chì u bloccu chì cuntene a sustanza hè cumplettamente polimerizatu.
Dopu a polimerizazione, i blocchi sò stati tagliati cù un microtomu LEICA RM2235 (Rankin Biomedical Corporation 10,399 Enterprise Dr. Davisburg, MI 48,350, USA) à un grossu di 3 mm.E rùbbriche sò raggruppati nantu à diapositive, cù sei sezioni per slide.I diapositivi sò stati siccati à a temperatura di l'ambienti, dopu macchiati cù hematoxilina per 7 min è lavati cù acqua corrente per 4 min.Inoltre, applicà a suluzione di eosina à a pelle per 5 minuti è lavà cù acqua corrente per 5 minuti.
A toxicità acuta hè stata prevista cù l'urganismi acquatici di diversi livelli tropicali: 96-ora di pesci LC50, 48-hour D. magna LC50, è 96-hour green algae EC50.A toxicità di i biosurfactants ramnolipidi à i pesci è l'alga verde hè stata valutata cù a versione di u software ECOSAR 2.2 per Windows sviluppatu da l'Agenzia di Proteczione Ambientale di i Stati Uniti.(Disponibile in linea à https://www.epa.gov/tsca-screening-tools/ecological-struct-activity-relationships-ecosar-predictive-model).
Tutte e teste per l'attività larvicida è antitermite sò stati realizati in triplicate.A regressione non lineare (log of dose response variables) di i dati di mortalità di larva è termite hè stata realizata per calculà a cuncentrazione letale mediana (LC50) cù un intervallu di cunfidenza di 95%, è e curve di risposta di cuncentrazione sò state generate cù Prism® (versione 8.0, GraphPad Software) Inc., USA) 84, 91.
U presente studiu palesa u putenziale di i biosurfactants microbiali pruduciutu da Enterobacter cloacae SJ2 cum'è l'agenti larvicidi è antitermite di mosquito, è stu travagliu cuntribuisce à una megliu comprensione di i miccanismi di l'azzione larvicida è antitermite.Studi istologici di larva trattatu cù biosurfactants dimustranu danni à u trattu digestivu, midgut, cortex cerebral è iperplasia di e cellule epiteliali intestinali.Risultati: A valutazione toxicologica di l'antitermite è l'attività larvicida di u biosurfactant rhamnolipid produttu da Enterobacter cloacae SJ2 hà revelatu chì questu isolatu hè un biopesticida potenziale per u cuntrollu di e malatie vettoriali di mosquitoes (Cx quinquefasciatus) è termites (O. obesus).Ci hè bisognu di capisce a toxicità ambientale sottostante di i biosurfactants è i so impatti ambientali potenziali.Stu studiu furnisce una basa scientifica per valutà u risicu ambientale di i biosurfactants.
    


Postu tempu: Apr-09-2024