Una seria di prucessi pilotu basati in capanne sò stati realizati in Khowe, in u Benin miridiunali, per valutà l'efficacia biologica di e zanzariere di prossima generazione, nove è testate in situ, contr'à i vettori di a malaria resistenti à e piretrine. E zanzariere invechjate in situ sò state rimosse da e famiglie dopu à 12, 24 è 36 mesi. I pezzi di tela tagliati da ITN interi sò stati analizati per a cumpusizione chimica è sò stati realizati biotest di suscettibilità durante ogni prova per valutà i cambiamenti in a resistenza à l'insetticidi in a pupulazione di vettori Khowe.
Interceptor® G2 hà superatu l'altri ITN, cunfirmendu a superiorità di e rete piretroidi è clorfenapir rispetto à altri tipi di rete. Frà i novi prudutti, tutti l'ITN di prossima generazione anu dimustratu una bioefficacia megliu cà Interceptor®; tuttavia, a magnitudine di stu miglioramentu hè stata ridutta dopu l'invecchiamentu in u campu per via di a più corta durabilità di i cumposti non piretroidi. Questi risultati mettenu in risaltu a necessità di migliurà a persistenza insetticida di l'ITN di prossima generazione.
InsetticidaE zanzariere trattate cù insetti (ITN) anu ghjucatu un rolu cruciale in a riduzione di a morbilità è di a mortalità di a malaria in l'ultimi 20 anni. Dapoi u 2004, più di 3 miliardi di ITN sò stati distribuiti in u mondu sanu, è studii di modelizazione suggerenu chì u 68% di i casi di malaria in l'Africa subsahariana sò stati evitati trà u 2000 è u 2015. Sfurtunatamente, a resistenza di e pupulazioni di vettori di a malaria à i piretroidi (a classa standard di insetticidi aduprati in l'ITN) hè aumentata significativamente, minaccendu l'efficacia di questu intervenimentu essenziale. À u listessu tempu, i prugressu in u cuntrollu di a malaria sò rallentati à livellu mundiale, cù un numeru di paesi à altu pesu chì sperimentanu un aumentu di i casi di malaria dapoi u 2015. Queste tendenze anu purtatu à u sviluppu di una nova generazione di prudutti ITN innovativi destinati à affrontà a minaccia di a resistenza à i piretroidi è à aiutà à riduce questu pesu è à ottene obiettivi mundiali ambiziosi.
Ci sò attualmente trè ITN di nova generazione nantu à u mercatu, ognunu chì combina un piretroide cù un altru insetticida o sinergista capace di superà a resistenza à i piretroidi in i vettori di a malaria. In l'ultimi anni, sò stati realizati numerosi studii cuntrullati randomizzati in cluster (RCT) per valutà l'efficacia epidemiologica di queste rete paragunate à e rete standard solu à base di piretroidi è per furnisce l'evidenza necessaria per sustene e raccomandazioni di l'Organizazione Mondiale di a Salute (OMS). E rete da letti chì combinanu piretroidi cù piperonil butossidu (PBO), un sinergista chì migliora l'efficacia di i piretroidi inibendu l'enzimi di disintossicazione di e zanzare, sò state e prime à esse raccomandate da l'OMS dopu chì dui prudutti (Olyset® Plus è PermaNet® 3.0) anu dimustratu un impattu epidemiologicu superiore paragunatu à e rete da letti solu à base di piretroidi in studii cuntrullati randomizzati in cluster in Tanzania è Uganda. Tuttavia, sò necessarii più dati per determinà u valore di salute publica di e rete da letti piretroidi-PBO in Africa Occidentale, induve una forte resistenza à i piretroidi pò riduce i so benefici paragunati à e rete da letti solu à base di piretroidi.
A persistenza insetticida di l'ITN hè tipicamente valutata raccogliendu periodicamente e rete da e cumunità è testendule in biosaggi di laburatoriu utilizendu ceppi di zanzare allevate da insetti. Mentre chì questi saggi sò utili per caratterizà a biodisponibilità è l'efficacia di l'insetticidi nantu à a superficia di e rete da letti in u tempu, furniscenu informazioni limitate nantu à l'efficacia comparativa di diversi tipi di rete da letti di prossima generazione perchè i metudi è i ceppi di zanzare utilizati devenu esse adattati à u modu d'azione di l'insetticidi chì cuntenenu. A prova sperimentale di a capanna hè un approcciu alternativu chì pò esse adupratu per valutà comparativamente l'efficacia di e rete trattate cù insetticida in studii di durabilità in cundizioni chì imitanu l'interazzione naturali trà l'ospiti di zanzare salvatiche è e rete domestiche durante l'usu. Infatti, studii di modellazione recenti chì utilizanu surrogati entomologichi per i dati epidemiologichi anu dimustratu chì a mortalità di e zanzare è i tassi di alimentazione misurati in questi prucessi ponu esse aduprati per predichendu l'impattu di l'ITN nantu à l'incidenza è a prevalenza di a malaria in RCT à cluster. Cusì, i prucessi sperimentali basati in capanne in i quali i linfonodi trattati cù insetticida raccolti in u campu sò inclusi in RCT in cluster ponu furnisce dati preziosi nantu à a bioefficacia cumparativa è a persistenza insetticida di i linfonodi trattati cù insetticida durante a so durata di vita prevista, è aiutà à interpretà i risultati epidemiologichi di sti studii.
A prova sperimentale di a capanna hè una simulazione standardizata di l'abitazione umana raccomandata da l'Organizazione Mondiale di a Salute per valutà l'efficacità di e zanzariere trattate cù insetticidi. Queste prove replicanu e cundizioni d'esposizione di u mondu reale chì l'ospiti di zanzare scontranu quandu interagiscenu cù e zanzariere domestiche è sò dunque un approcciu assai apprupriatu per valutà l'efficacità biologica di e zanzariere usate durante a so vita di serviziu prevista.
Questu studiu hà valutatu l'efficacia entomologica di trè sfarenti tippi di zanzariere insetticide di nova generazione (PermaNet® 3.0, Royal Guard® è Interceptor® G2) in cundizioni di campu in stalle sperimentali è li hà paragunati cù una rete standard solu à base di piretrina (Interceptor®). Tutte queste zanzariere trattate cù insetticida sò incluse in a lista prequalificata di l'OMS per u cuntrollu di i vettori. E caratteristiche dettagliate di ogni zanzariera sò furnite quì sottu:
In marzu 2020, una campagna di distribuzione à grande scala di zanzariere invechjate in u campu hè stata realizata in i paesi di capanne in a Prefettura di Zou, in u Benin miridiunali, per prove pilota in capanne. E zanzariere Interceptor®, Royal Guard® è Interceptor® G2 sò state selezziunate da gruppi selezziunati à casu in i municipii di Kove, Zagnanado è Ouinhi cum'è parte di un studiu d'osservazione di durabilità annidatu in un RCT à grappuli per valutà l'efficacia epidemiologica di e zanzariere trattate cù dui insetticidi. E zanzariere PermaNet® 3.0 sò state raccolte in u paese di Avokanzun vicinu à i paesi di Jija è Bohicon (7°20′ N, 1°56′ E) è distribuite simultaneamente cù e zanzariere à grappuli RCT durante a campagna di massa 2020 di u Prugramma Naziunale di Cuntrollu di a Malaria. A Figura 1 mostra e locu di i gruppi/villaggi di studiu induve i diversi tipi di ITN sò stati raccolti in relazione à i siti sperimentali di e capanne.
Una prova pilotu in capanna hè stata realizata per paragunà a prestazione entomologica di Interceptor®, PermaNet® 3.0, Royal Guard® è Interceptor® G2 ITN quandu sò stati rimossi da e famiglie à 12, 24 è 36 mesi dopu a diffusione. À ogni puntu di tempu annuale, a prestazione di l'ITN invechjati in u campu hè stata paragunata cù rete nove è micca aduprate di ogni tipu è rete micca trattate cum'è cuntrollu negativu. À ogni puntu di tempu annuale, un totale di 54 campioni replicati di ITN invechjati in u campu è 6 ITN novi di ogni tipu sò stati testati in 1 o 2 prove replicate in capanna cù rotazione cutidiana di trattamenti. Prima di ogni prova in capanna, l'indice mediu di porosità di e rete di campu invechjate di ogni tipu d'ITN hè statu misuratu secondu e raccomandazioni di l'OMS. Per simulà l'usura da l'usu cutidianu, tutti l'ITN novi è e rete di cuntrollu micca trattate sò state perforate cù sei fori di 4 x 4 cm: dui in ogni pannellu laterale longu è unu in ogni pannellu laterale cortu, in cunfurmità cù e raccomandazioni di l'OMS. A zanzariera hè stata stallata in a capanna ligendu i bordi di e lamiere di u tettu cù corde à chiodi in l'anguli superiori di i muri di a capanna. I trattamenti seguenti sò stati valutati in ogni prova di capanna:
E rete invechjate in u campu sò state valutate in capanne sperimentali in u stessu annu di a rimozione di e rete. E prove di e capanne sò state realizate in u stessu situ da maghju à settembre 2021, da aprile à ghjugnu 2022, è da maghju à lugliu 2023, cù e rete rimosse dopu à 12, 24 è 36 mesi, rispettivamente. Ogni prova hè durata un ciclu di trattamentu cumpletu (54 notti in 9 settimane), eccettu per 12 mesi, quandu sò stati realizati dui cicli di trattamentu consecutivi per aumentà a dimensione di u campione di zanzare. Seguendu un disignu quadratu latinu, i trattamenti sò stati rotati settimanalmente trà e capanne sperimentali per cuntrullà l'effetti di a situazione di e capanne, mentre chì i vuluntarii sò stati rotati ogni ghjornu per cuntrullà e differenze in l'attrattività di e zanzare di i singoli ospiti. E zanzare sò state raccolte 6 ghjorni à settimana; u ghjornu 7, prima di u prossimu ciclu di rotazione, e capanne sò state pulite è ventilate per prevene l'infestazione.
I punti principali di efficacia per u trattamentu sperimentale in capanna contr'à e zanzare Anopheles gambiae resistenti à i piretroidi è u paragone di l'ITN di prossima generazione cù a rete Interceptor® solu à piretroidi eranu:
I punti finali di efficacia secundarii per u trattamentu sperimentale in capanna contr'à e zanzare Anopheles gambiae resistenti à i piretroidi eranu i seguenti:
Cuntenimentu (%) - riduzione di a tarifa d'entrata in u gruppu trattatu paragunatu à u gruppu micca trattatu. U calculu hè u seguente:
induve Tu hè u numeru di zanzare incluse in u gruppu di cuntrollu micca trattatu, è Tt hè u numeru di zanzare incluse in u gruppu trattatu.
Tassa di Churn (%) – Tassa di churn per via di una putenziale irritazione da u trattamentu, espressa cum'è una proporzione di zanzare raccolte nantu à u balcone.
U coefficientu di soppressione di e zanzare succhiatrici di sangue (%) hè a riduzione di a proporzione di zanzare succhiatrici di sangue in u gruppu trattatu paragunatu à u gruppu di cuntrollu micca trattatu. U metudu di calculu hè u seguente: induve Bfu hè a proporzione di zanzare succhiatrici di sangue in u gruppu di cuntrollu micca trattatu, è Bft hè a proporzione di zanzare succhiatrici di sangue in u gruppu trattatu.
Riduzione di a fertilità (%) - a riduzione di a proporzione di zanzare fertili in u gruppu trattatu paragunatu à u cuntrollu micca trattatu. U metudu di calculu hè u seguente: induve Fu hè a proporzione di zanzare fertili in u gruppu di cuntrollu micca trattatu, è Ft hè a proporzione di zanzare fertili in u gruppu trattatu.
Per monitorà i cambiamenti in u prufilu di resistenza di e pupulazioni di vettori Covè in u tempu, l'OMS hà realizatu biotest in vitro è in fiale in u stessu annu di ogni prova sperimentale in capanna (2021, 2022, 2023) per valutà a suscettibilità à l'AI in l'ITN in studiu è per informà l'interpretazione di i risultati. In i studii in vitro, e zanzare sò state esposte à carte da filtru trattate cù concentrazioni definite di alfa-cipermetrina (0,05%) è deltametrina (0,05%), è à buttiglie rivestite cù concentrazioni definite di CFP (100 μg/buttiglia) è PPF (100 μg/buttiglia) per valutà a suscettibilità à questi insetticidi. L'intensità di a resistenza à i piretroidi hè stata investigata espunendu e zanzare à concentrazioni differenziali di 5 volte (0,25%) è 10 volte (0,50%) di α-cipermetrina è deltametrina. Infine, u cuntributu di a sinergia di u PBO è di a sovraespressione di a monoossigenasi di u citocromo P450 (P450) à a resistenza à i piretroidi hè statu valutatu preespunendu i zanzare à diverse concentrazioni di α-cipermetrina (0,05%) è deltametrina (0,05%), è preesposizione à u PBO (4%). A carta da filtru aduprata per u test in tubu di l'OMS hè stata acquistata da Universiti Sains Malaysia. I flaconi di test di bioanalisi di l'OMS chì utilizanu CFP è PPF sò stati preparati secondu e raccomandazioni di l'OMS.
E zanzare aduprate per i biotesti sò state raccolte à u stadiu larvale da i siti di ripruduzzione vicinu à e capanne sperimentali è poi allevate finu à l'età adulta. À ogni puntu di tempu, almenu 100 zanzare sò state esposte à ogni trattamentu per 60 minuti, cù 4 repliche per tubu/buttiglia è circa 25 zanzare per tubu/buttiglia. Per l'esposizioni à i piretroidi è à i CFP, sò state aduprate zanzare di 3-5 ghjorni senza alimentazione, mentre chì per i PPF, sò state aduprate zanzare succhiasangue di 5-7 ghjorni per stimulà l'oogenesi è valutà l'effettu di i PPF nantu à a ripruduzzione di e zanzare. L'esposizioni parallele sò state realizate aduprendu carta da filtru impregnata d'oliu di silicone, PBO puru (4%) è buttiglie rivestite d'acetone cum'è cuntrolli. À a fine di l'esposizione, e zanzare sò state trasferite in contenitori senza trattamentu è esposte à cuttone imbevutu in una soluzione di glucosiu à u 10% (p/v). A mortalità hè stata registrata 24 ore dopu l'esposizione à i piretroidi è ogni 24 ore per 72 ore dopu l'esposizione à i CFP è i PPF. Per valutà a suscettibilità à u PPF, i zanzari sopravvissuti esposti à u PPF è i cuntrolli negativi currispondenti sò stati dissezionati dopu chì a mortalità ritardata hè stata registrata, u sviluppu ovarianu hè statu osservatu cù un microscopiu cumpostu, è a fertilità hè stata valutata secondu u stadiu di sviluppu di l'ova di Christophers [28, 30]. Se l'ova si sò sviluppate cumpletamente finu à u stadiu V di Christophers, i zanzari sò stati classificati cum'è fertili, è se l'ova ùn eranu micca cumpletamente sviluppate è sò rimaste à i stadii I-IV, i zanzari sò stati classificati cum'è sterili.
À ogni mumentu di l'annu, pezzi di 30 × 30 cm sò stati tagliati da rete nove è invechjate in u campu in i lochi specificati in e raccomandazioni di l'OMS [22]. Dopu u tagliu, e rete sò state etichettate, imballate in carta d'aluminiu è conservate in frigorifero à 4 ± 2 °C per impedisce a migrazione di l'IA in u tessutu. E rete sò state poi mandate à u Centru Vallone di Ricerca Agricola in Belgio per analisi chimiche per misurà i cambiamenti in u cuntenutu tutale di IA durante a so vita di serviziu. I metudi analitici utilizati (basati nantu à i metudi raccomandati da u Cumitatu Cooperativu Internaziunale per l'Analisi di i Pesticidi) sò stati descritti prima [25, 31].
Per i dati di a prova sperimentale in capanna, u numeru tutale di zanzare vive/morte, chì pungevanu/ùn pungevanu è fertili/sterili in i diversi compartimenti di e capanna hè statu summatu per ogni trattamentu in ogni prova per calculà i vari risultati proporzionali (mortalità à 72 ore, pungiglione, ectoparassitismu, intrappolamentu di a rete, fertilità) è i so currispondenti intervalli di fiducia à 95% (IC). E differenze trà i trattamenti per questi risultati binari proporzionali sò state analizzate utilizendu a regressione logistica, mentre chì e differenze per i risultati di u conteggio sò state analizzate utilizendu a regressione binomiale negativa. Siccome dui cicli di rotazione di trattamentu sò stati realizati ogni 12 mesi è alcuni trattamenti sò stati testati in diverse prove, l'analisi di penetrazione di e zanzare sò state adattate per u numeru di ghjorni chì ogni trattamentu hè statu testatu. U novu ITN per ogni risultatu hè statu ancu analizatu per ottene una sola stima per tutti i punti di tempu. Oltre à a principale variabile esplicativa di u trattamentu, ogni mudellu hà inclusu a capanna, u dormiente, u periodu di prova, l'indice di apertura di l'ITN è u ghjornu cum'è effetti fissi per cuntrullà a variazione dovuta à e differenze in l'attrattività individuale di u dormiente è di a capanna, a stagionalità, u statu di a zanzariera è l'eccessu di dispersione. L'analisi di regressione anu pruduttu rapporti di probabilità (OR) aghjustati è intervalli di fiducia di 95% currispondenti per stimà l'effettu di l'ITN di nova generazione paragunatu à a rete solu piretroide, Interceptor®, nantu à i risultati primari di a mortalità è a fecundità di e zanzare. I valori P di i mudelli sò stati ancu aduprati per assignà lettere compatte chì indicanu a significatività statistica à u livellu di 5% per tutte e paraguni à coppie di i risultati primari è secundarii. Tutte l'analisi di regressione sò state realizate in Stata versione 18.
A suscettibilità di e pupulazioni di u vettore Covese hè stata interpretata basendu si nantu à a mortalità è a fecundità osservate in vitro è in i biotest in buttiglia secondu e raccomandazioni di l'Organizazione Mondiale di a Salute. I risultati di l'analisi chimica anu furnitu un cuntenutu tutale di AI in i frammenti di ITN, chì hè statu utilizatu per calculà u tassu di ritenzione di AI in e rete invechjate in u campu paragunatu à e nuove rete in ogni puntu di tempu ogni annu. Tutti i dati sò stati registrati manualmente nantu à moduli standardizati è dopu inseriti duie volte in una basa di dati Microsoft Excel.
I Cumitati Etichi di u Ministeru di a Salute di u Benin (n. 6/30/MS/DC/DRFMT/CNERS/SA), a London School of Hygiene & Tropical Medicine (LSHTM) (n. 16237) è l'Organizazione Mondiale di a Salute (n. ERC.0003153) anu appruvatu a realizazione di una prova pilotu in capanna chì implicava vuluntarii. U cunsensu infurmatu scrittu hè statu ottenutu da tutti i vuluntarii prima di a participazione à u studiu. Tutti i vuluntarii anu ricevutu chemoprofilassi gratuita per riduce u risicu di malaria, è un'infermiera era di serviziu durante tutta a prova per valutà qualsiasi vuluntariu chì hà sviluppatu sintomi di frebba o una reazione avversa à u pruduttu di prova.
I risultati cumpleti di e capanne sperimentali, chì riassumenu u numeru tutale di zanzare vive/morte, affamate/nutrite di sangue è fertili/sterili per ogni gruppu sperimentale, è ancu e statistiche descrittive sò presentate cum'è materiale supplementariu (Tabella S1).
In una capanna sperimentale in Kowa, Benin, l'alimentazione di sangue di e zanzare Anopheles gambiae resistenti à i piretroidi salvatichi hè stata soppressa. I dati di i cuntrolli micca trattati è di e nuove reti sò stati raggruppati in i prucessi per furnisce una sola stima di efficacia. Per analisi di regressione logistica, e colonne cù lettere cumune ùn eranu micca significativamente diverse à u livellu di 5% (p > 0,05). E barre d'errore rapprisentanu intervalli di fiducia di 95%.
Mortalità di e zanzare Anopheles gambiae resistenti à i piretroidi salvatichi chì entranu in una capanna sperimentale in Kowa, Benin. I dati di i cuntrolli micca trattati è di e nuove reti sò stati raggruppati in i prucessi per furnisce una sola stima di l'efficacia. Per analisi di regressione logistica, e colonne cù lettere cumune ùn eranu micca significativamente diverse à u livellu di 5% (p > 0,05). E barre d'errore rapprisentanu intervalli di fiducia di 95%.
U rapportu di probabilità descrive a differenza di mortalità cù e zanzariere di nova generazione paragunate à e zanzariere solu à base di piretroidi. A linea punteggiata rapprisenta un rapportu di probabilità di 1, chì ùn indica alcuna differenza di mortalità. Un rapportu di probabilità > 1 indica una mortalità più alta cù e zanzariere di nova generazione. I dati per e zanzariere di nova generazione sò stati raggruppati in tutti i prucessi per pruduce una sola stima di l'efficacia. E barre d'errore rapprisentanu intervalli di fiducia di u 95%.
Ancu s'è Interceptor® hà dimustratu a mortalità a più bassa di tutte e rete ittiche testate, l'invecchiamentu in u campu ùn hà micca avutu un impattu negativu nantu à a mortalità di i vettori. In fatti, u novu Interceptor® hà risultatu in una mortalità di u 12%, mentre chì e rete invecchiate in u campu anu mostratu un ligeru miglioramentu à 12 mesi (17%, p=0,006) è 24 mesi (17%, p=0,004), prima di vultà à livelli simili à e nuove rete à 36 mesi (11%, p=0,05). In cuntrastu, i tassi di mortalità per a prossima generazione di rete trattate cù insetticida sò diminuiti gradualmente cù u tempu dopu u spiegamentu. A riduzione hè stata più pronunciata cù Interceptor® G2, induve a mortalità hè diminuita da u 58% cù e nuove maglie à u 36% à 12 mesi (p< 0,001), 31% à 24 mesi (p< 0,001), è 20% à 36 mesi (p< 0,001). U novu PermaNet® 3.0 hà risultatu in una riduzione di a mortalità à 37%, chì hè ancu diminuita significativamente à 20% à 12 mesi (p< 0,001), 16% à 24 mesi (p< 0,001), è 18% à 36 mesi (p< 0,001). Una tendenza simile hè stata osservata cù Royal Guard®, cù a nova maglia chì hà risultatu in una riduzione di 33% di a mortalità, seguita da una riduzione significativa à 21% à 12 mesi (p< 0,001), 17% à 24 mesi (p< 0,001) è 15% à 36 mesi (p< 0,001).
Riduzione di a fecundità di e zanzare Anopheles gambiae resistenti à i piretroidi salvatichi chì entranu in una capanna sperimentale in Kwa, Benin. I dati di i cuntrolli micca trattati è di e nuove reti sò stati raggruppati in i prucessi per furnisce una sola stima di l'efficacia. E barre cù lettere cumune ùn eranu micca significativamente diverse à u livellu di 5% (p > 0,05) per analisi di regressione logistica. E barre d'errore rapprisentanu intervalli di cunfidenza di 95%.
I rapporti di probabilità descrivenu a differenza di fertilità cù e zanzariere di nova generazione paragunate à e zanzariere solu à base di piretroidi. A linea punteggiata rapprisenta un rapportu di 1, chì indica chì ùn ci hè alcuna differenza di fertilità. Rapporti di probabilità< 1 indica una riduzione più grande di a fertilità cù e zanzariere di nova generazione. I dati per e zanzariere di nova generazione sò stati raggruppati in diverse prove per pruduce una sola stima di l'efficacia. E barre d'errore rapprisentanu intervalli di fiducia di 95%.
Data di publicazione: 17 di ferraghju 2025