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Combinazione di composti terpeni à basa di olii essenziali vegetali cum'è rimediu larvicida è adultu contr'à Aedes aegypti (Diptera: Culicidae)

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A cumminazzioni di cumposti insetticidi derivati ​​da a pianta pò esibisce interazzioni sinergici o antagonisti contra i pesti.Data a rapida diffusione di e malatie purtate da i mosquitoes Aedes è a crescente resistenza di e pupulazioni di mosquito Aedes à l'insetticidi tradiziunali, vintottu cumminazzioni di composti terpeni basati nantu à l'olii essenziali vegetali sò stati formulati è testati contru i stadi larvali è adulti di Aedes aegypti.Cinque olii essenziali vegetali (EO) sò stati inizialmente valutati per a so efficacità larvicida è l'usu di l'adulti, è dui composti principali sò stati identificati in ogni EO basatu nantu à i risultati GC-MS.I cumposti principali identificati sò stati acquistati, vale à dì diallyl disulfide, diallyl trisulfide, carvone, limonene, eugenol, metil eugenol, eucalyptol, eudesmol è mosquito alfa-pinene.E combinazioni binari di sti cumposti sò stati preparati cù dosi subletali è i so effetti sinergici è antagonisti sò stati pruvati è determinati.I megliu cumpunimenti larvicidi sò ottenuti mischjendu limonene cù disulfuru di diallyl, è i migliori cumpunimenti adulticidi sò ottenuti mischjendu carvone cù limonene.U larvicida sinteticu Temphos è a droga adulta Malathion sò stati pruvati separatamente è in combinazioni binari cù terpenoidi.I risultati anu dimustratu chì a cumminazzioni di temephos è disulfuru di diallyl è malathion è eudesmol era a cumminazione più efficace.Queste combinazioni potenti anu un putenziale di usu contru Aedes aegypti.
L'olii essenziali vegetali (EO) sò metaboliti secundari chì cuntenenu diversi composti bioattivi è diventanu sempre più impurtanti cum'è una alternativa à i pesticidi sintetici.Ùn sò micca solu amichevuli di l'ambiente è di l'utilizatori, ma sò ancu una mistura di diversi composti bioattivi, chì riduce ancu a probabilità di sviluppà resistenza à a droga1.Utilizendu a tecnulugia GC-MS, i circadori anu esaminatu i custituenti di diversi olii essenziali vegetali è identificanu più di 3 000 composti da 17 500 piante aromatiche2, a maiò parte di e quali sò stati pruvati per e proprietà insetticidi è sò signalati per avè effetti insetticidi 3,4.Certi studii mette in risaltu chì a toxicità di u cumpunente principale di u compostu hè uguale o più grande di quellu di u so oxidu di etilene crudu.Ma l'usu di cumposti individuali pò abbandunà novu spaziu per u sviluppu di resistenza, cum'è u casu cù l'insecticidi chimichi5,6.Dunque, l'attuale focus hè nantu à a preparazione di miscele di composti basati in l'ossidu di etilene per migliurà l'efficacità insetticida è riduce a probabilità di resistenza in populazioni di pesti di destinazione.I cumposti attivi individuali prisenti in l'EO ponu esse effetti sinergici o antagonisti in cumminzioni chì riflettenu l'attività generale di l'EO, un fattu chì hè statu bè enfatizatu in studii realizati da circadori precedenti7,8.U prugramma di cuntrollu di vettori include ancu EO è i so cumpunenti.L'attività mosquitocida di l'olii essenziali hè stata largamente studiata nantu à i mosquitoes Culex è Anopheles.Diversi studii anu pruvatu à sviluppà pesticidi efficaci cumminendu diverse piante cù pesticidi sintetici utilizati cummerciale per aumentà a toxicità generale è minimizzà l'effetti secundari9.Ma i studii di tali composti contr'à Aedes aegypti restanu rari.Avanzate in a scienza medica è u sviluppu di droghe è vaccini anu aiutatu à cumbatte alcune malatie vettoriali.Ma a prisenza di diversi serotipi di virus, trasmessi da u mosquito Aedes aegypti, hà purtatu à u fallimentu di i prugrammi di vaccinazione.Per quessa, quandu tali malatie accade, i prugrammi di cuntrollu di vettore sò l'unica opzione per prevene a diffusione di a malatia.In u scenariu attuale, u cuntrollu di Aedes aegypti hè assai impurtante perchè hè un vettore chjave di vari virus è i so serotipi chì causanu a febbre dengue, Zika, febbre hemorrhagic dengue, febbre gialla, etc. A cosa più degne di nota hè u fattu chì u numeru di I casi di quasi tutte e malatie vettoriali Aedes-borne sò in crescita ogni annu in Egittu è crescenu in u mondu sanu.Dunque, in questu cuntestu, ci hè una necessità urgente di sviluppà misure di cuntrollu efficaci è efficaci per l'ambiente per e pupulazioni di Aedes aegypti.I candidati potenziali in questu sensu sò EO, i so cumposti custituenti, è e so cumminzioni.Per quessa, stu studiu hà pruvatu à identificà combinazioni sinergici efficaci di cumposti EO di e piante chjave da cinque piante cù proprietà insetticidi (vale à dì, menta, basilica santa, Eucalyptus spotted, Allium sulphur è melaleuca) contr'à Aedes aegypti.
Tutti l'EO selezziunati anu dimustratu l'attività larvicida potenziale contr'à Aedes aegypti cù LC50 24-h chì varieghja da 0,42 à 163,65 ppm.L'attività larvicida più alta hè stata registrata per a menta (Mp) EO cun un valore LC50 di 0.42 ppm à 24 h, seguita da l'agliu (As) cun un valore LC50 di 16.19 ppm à 24 h (Table 1).
À l'exception d'Ocimum Sainttum, Os EO, tous les autres quatre EO criblés ont montré des effets allercides évidents, avec des valeurs de LC50 allant de 23,37 à 120,16 ppm sur la période d'exposition de 24 heures.Thymophilus striata (Cl) EO era più efficace per uccidere l'adulti cun un valore LC50 di 23,37 ppm in 24 ore di esposizione, seguitu da Eucalyptus maculata (Em) chì avia un valore LC50 di 101,91 ppm (Table 1).Per d 'altra banda, u valore LC50 per Os ùn hè ancu statu determinatu postu chì a più alta rata di mortalità di 53% hè stata registrata à a dosa più alta (Figura supplementaria 3).
I dui cumposti custituenti principali in ogni EO sò stati identificati è scelti nantu à i risultati di a basa di dati di a biblioteca NIST, u percentualità di l'area di cromatogramma GC è i risultati di spettri MS (Table 2).Per EO As, i cumposti principali identificati eranu disulfuru di diallyl è trisulfuru di diallyl;per EO Mp i cumposti principali identificati eranu carvone è limonene, per EO Em i cumposti principali identificati eranu eudesmol è eucalyptol;Per EO Os, i cumposti principali identificati eranu eugenol è metil eugenol, è per EO Cl, i cumposti principali identificati eranu eugenol è α-pinene (Figura 1, Figure Supplementari 5-8, Tabella Supplementaria 1-5).
Risultati di spettrometria di massa di i principali terpenoidi di l'olii essenziali selezziunati (A-diallyl disulfide; B-diallyl trisulfide; C-eugenol; D-methyl eugenol; E-limonene; F-ceperone aromaticu; G-α-pinene; H-cineole) ; R-eudamol).
Un totale di nove composti (diallyl disulfide, diallyl trisulfide, eugenol, metil eugenol, carvone, limonene, eucalyptol, eudesmol, α-pinene) sò stati identificati cum'è composti efficaci chì sò i cumpunenti principali di EO è sò stati bioassay individualmente contr'à Aedes aegypti à larva. tappe..U compostu eudesmol hà avutu l'attività larvicida più altu cù un valore LC50 di 2,25 ppm dopu à 24 ore di esposizione.I composti di diallyl disulfide è diallyl trisulfide sò stati ancu truvati per avè effetti larvicidi potenzali, cù dosi subletali medii in a gamma di 10-20 ppm.L'attività larvicida moderata hè stata osservata di novu per i composti eugenol, limonene è eucalyptol cù valori LC50 di 63,35 ppm, 139,29 ppm.è 181.33 ppm dopu à 24 ore, rispettivamente (Table 3).In ogni casu, nisun potenziale larvicida significativu di metil eugenol è carvone hè statu truvatu ancu à e dosi più altimi, cusì i valori LC50 ùn sò micca stati calculati (Table 3).U larvicida sinteticu Temephos hà avutu una concentrazione letale media di 0,43 ppm contru Aedes aegypti in 24 ore di esposizione (Tabella 3, Tabella Supplementaria 6).
Sette composti (disulfuru di diallyle, trisulfuru di diallyle, eucalyptol, α-pinene, eudesmol, limonene è carvone) sò stati identificati cum'è i cumposti principali di EO efficace è sò stati testati individualmente contr'à i mosquitos egiziani Aedes adulti.Sicondu l'analisi di regressione Probit, Eudesmol hè stata trovata per avè u più altu potenziale cù un valore LC50 di 1.82 ppm, seguita da Eucalyptol cun un valore LC50 di 17.60 ppm à u tempu di esposizione di 24 ore.I restanti cinque composti testati eranu moderatamente dannosi per l'adulti cù LC50 chì varieghja da 140.79 à 737.01 ppm (Table 3).U malathion d'organofosforu sinteticu era menu putente di l'eudesmol è più altu ch'è l'altri sei composti, cun un valore LC50 di 5.44 ppm in u periodu di esposizione di 24 ore (Tabella 3, Tabella Supplementaria 6).
Sette potenti cumposti di piombo è u tamefosatu di organofosforu sò stati scelti per furmulà combinazioni binari di e so dosi LC50 in un rapportu 1: 1.Un totale di 28 combinazioni binari sò stati preparati è pruvati per a so efficacità larvicida contru Aedes aegypti.Nove cumminazzioni sò stati trovati sinergici, 14 cumminzioni eranu antagonisti, è cinque cumminzioni ùn eranu micca larvicidi.Trà e cumminazzioni sinergici, a cumminazzioni di diallyl disulfide è temofol hè stata a più efficace, cù 100% di mortalità osservata dopu à 24 ore (Table 4).In listessu modu, mischii di limonene cù disulfuru di diallyl è eugenol cù thymetphos mostranu un bonu potenziale cù una mortalità di larva osservata di 98,3% (Table 5).I restanti 4 combinazioni, vale à dì eudesmol plus eucalyptol, eudesmol plus limonene, eucalyptol plus alpha-pinene, alpha-pinene plus temephos, anu ancu mostratu una efficacità larvicida significativa, cù i tassi di mortalità osservati chì superanu u 90%.A rata di mortalità prevista hè vicinu à 60-75%.(Table 4).Tuttavia, a cumminazzioni di limonene cù α-pinene o eucalyptus hà mostratu reazzioni antagonistiche.De même, les mélanges de Temephos avec eugenol ou eucalyptus ou eudesmol ou trisulfure de diallyl ont été trouvés pour avoir des effets antagonistes.In listessu modu, a cumminazzioni di disulfuru di diallyl è trisulfuru di diallyl è a cumminazzioni di unu di sti composti cù eudesmol o eugenol sò antagonisti in a so azzione larvicida.L'antagonismu hè statu ancu signalatu cù a cumminazzioni di eudesmol cù eugenol o α-pinene.
Di tutti i mischi binari 28 pruvati per l'attività àcida adulta, 7 cumminzioni eranu sinergici, 6 ùn anu micca effettu, è 15 eranu antagonisti.I mischi di eudesmol cù eucalyptus è limonene cù carvone sò stati trovati più efficaci cà l'altri cumminzioni sinergichi, cù i tassi di mortalità à 24 ore di 76% è 100%, rispettivamente (Table 5).Malathion hè statu osservatu per esibisce un effettu sinergicu cù tutte e cumminazzioni di composti eccettu limonene è trisulfuru di diallyl.Per d 'altra banda, l'antagonismu hè statu trovu trà diallyl disulfide è diallyl trisulfide è a cumminazzioni di l'una cù l'eucalyptus, o eucalyptol, o carvone, o limonene.De même, les combinaisons d'α-pinène avec eudesmol ou limonène, eucalyptol avec carvone ou limonène, et limonène avec eudesmol ou malathion ont montré des effets larvicides antagonistes.Per e sei cumminazzioni rimanenti, ùn ci era micca una diferenza significativa trà a mortalità prevista è osservata (Table 5).
Basatu nantu à effetti sinergici è dosi subletali, a so toxicità larvicida contr'à un gran numaru di mosquitoes Aedes aegypti hè stata ultimamente selezziunata è ulteriormente testata.I risultati anu dimustratu chì a mortalità di larva osservata cù e combinazioni binari eugenol-limonene, diallyl disulfide-limonene è diallyl disulfide-timephos era 100%, mentre chì a mortalità larvale prevista era 76.48%, 72.16% è 63.4%, rispettivamente (Table 6 )..A cumminazzioni di limonene è eudesmol era relativamente menu efficace, cù 88% di mortalità di larva osservata annantu à u periodu di esposizione di 24 ore (Table 6).In riassuntu, e quattru combinazioni binari selezziunati anu ancu dimustratu effetti larvicidi sinergici contr'à Aedes aegypti quandu sò appiicati à grande scala (Table 6).
Trè combinazioni sinergiche sò state scelte per u bioassay adultocidale per cuntrullà grandi populazioni di Aedes aegypti adulti.Per selezziunà e cumminzioni per pruvà à e grandi culunii d'insetti, avemu prima focu annantu à e duie megliu combinazioni di terpeni sinergici, à dì carvone plus limonene è eucalyptol plus eudesmol.Siconda, a megliu cumminazione sinergica hè stata scelta da a cumminazzioni di malathion organofosforatu sinteticu è terpenoidi.Cridemu chì a cumminazione di malathion è eudesmol hè a megliu cumminazione per a prova nantu à grandi culunii d'insetti per via di a più alta mortalità osservata è di i valori LC50 assai bassi di l'ingredienti candidati.Malathion mostra un sinergisimu in combinazione cù α-pinene, disulfure di diallyle, eucalyptus, carvone è eudesmol.Ma s'è guardemu i valori LC50, Eudesmol hà u valore più bassu (2,25 ppm).I valori LC50 calculati di malathion, α-pinene, disulfuru di diallyle, eucalyptol è carvone eranu 5.4, 716.55, 166.02, 17.6 è 140.79 ppm.rispettivamente.Questi valori indicanu chì a cumminazione di malathion è eudesmol hè a cumminazione ottima in quantu à a dosa.I risultati anu dimustratu chì e cumminazzioni di carvone più limonene è eudesmol più malathion anu avutu 100% di mortalità osservata cumparatu cù una mortalità prevista di 61% à 65%.Una altra cumminazione, eudesmol più eucalyptol, hà dimustratu una mortalità di 78,66% dopu à 24 ore di esposizione, paragunatu à una rata di mortalità prevista di 60%.Tutte e trè combinazioni selezziunate anu dimustratu effetti sinergichi ancu quandu sò applicati à grande scala contr'à Aedes aegypti adultu (Table 6).
In questu studiu, e piante selezziunate EO cum'è Mp, As, Os, Em è Cl anu dimustratu effetti letali promettenti nantu à i stadi larvari è adulti di Aedes aegypti.Mp EO hà avutu a più alta attività larvicida cù un valore LC50 di 0,42 ppm, seguitu da As, Os è Em EO cun un valore LC50 di menu di 50 ppm dopu à 24 h.Questi risultati sò cunsistenti cù studii precedenti di mosquitoes è altre mosche ditterous10,11,12,13,14.Ancu s'è a putenza larvicida di Cl hè più bassu di l'altri olii essenziali, cù un valore LC50 di 163,65 ppm dopu à 24 ore, u so potenziale adultu hè u più altu cù un valore LC50 di 23,37 ppm dopu à 24 ore.Mp, As è Em EO anu ancu dimustratu un bonu potenziale allercidale cù i valori LC50 in a gamma di 100-120 ppm à 24 h di esposizione, ma eranu relativamente più bassi di a so efficacità larvicida.Per d 'altra banda, EO Os hà dimustratu un effettu allercidale insignificante ancu à a dosa terapeutica più alta.Cusì, i risultati indicanu chì a toxicità di l'oxidu d'etilene à e piante pò varià secondu u stadiu di sviluppu di i mosquitoes15.Dipende ancu da a rata di penetrazione di l'EO in u corpu di l'insetti, a so interazzione cù l'enzimi target specifichi, è a capacità di disintossicazione di u mosquito in ogni stadiu di u sviluppu16.Un gran numaru di studii anu dimustratu chì u cumpunente principale hè un fattore impurtante in l'attività biologica di l'ossidu di etilene, postu chì cuntene a maiò parte di i cumposti totali3,12,17,18.Dunque, avemu cunsideratu dui cumposti principali in ogni EO.Basatu nantu à i risultati GC-MS, disulfuru di diallyle è trisulfuru di diallyle sò stati identificati cum'è i cumposti principali di EO As, chì hè coherente cù i rapporti precedenti19,20,21.Ancu s'è i rapporti precedenti indicanu chì u mentolu era unu di i so cumposti principali, carvone è limonene sò stati identificati di novu cum'è i cumposti principali di Mp EO22,23.U prufilu di cumpusizioni di Os EO hà dimustratu chì l'eugenol è u metil eugenol sò i cumposti principali, chì hè simile à i risultati di i ricercatori precedenti16,24.Eucalyptol è eucalyptol sò stati signalati cum'è i cumposti principali prisenti in Em foglia oliu, chì hè coherente cù i scuperti di qualchi circadori25,26 ma contru à i scuperti di Olalade et al.27.A dominanza di cineole è α-pinene hè stata osservata in l'oliu essenziale di melaleuca, chì hè simile à studii precedenti28,29.Differenzi intraspecifici in a cumpusizioni è a cuncentrazione di l'olii essenziali estratti da a listessa spezia vegetale in diversi lochi sò stati rappurtati è sò stati ancu osservati in stu studiu, chì sò influenzati da e cundizioni di crescita di a pianta geografica, u tempu di cugliera, u stadiu di sviluppu o l'età di a pianta.apparenza di chimiotipi, etc.22,30,31,32.I cumposti chjave identificati sò stati dopu acquistati è pruvati per i so effetti larvicidi è l'effetti nantu à i mosquitos Aedes aegypti adulti.I risultati anu dimustratu chì l'attività larvicida di disulfuru di diallyle era paragunabile à quella di l'EO As crudo.Ma l'attività di diallyl trisulfide hè più altu ch'è EO As.Questi risultati sò simili à quelli ottenuti da Kimbaris et al.33 nantu à Culex Filippine.In ogni casu, sti dui cumposti ùn anu micca mostratu una bona attività autocida contr'à i mosquitoes target, chì hè coherente cù i risultati di Plata-Rueda et al 34 nantu à Tenebrio molitor.Os EO hè efficace contr'à u stadiu larvale di Aedes aegypti, ma micca contru u stadiu adultu.Hè statu stabilitu chì l'attività larvicida di i cumposti individuali principali hè più bassu di quellu di crudo Os EO.Questu implica un rolu per altri composti è e so interazzione in l'oxidu di etilene crudu.Metil eugenol solu hà attività insignificante, mentri eugenol solu hà attività larvicida moderata.Sta cunclusione cunfirma, da una banda,35,36, è da l'altra banda, cuntradisce e cunclusioni di i ricercatori precedenti37,38.E sferenze in i gruppi funziunali di eugenol è methyleugenol ponu risultatu in diverse tossicità per u stessu insetti di destinazione39.Limonene hè stata trovata per avè una attività larvicida moderata, mentri l'effettu di a carvone era insignificante.In listessu modu, a toxicità relativamente bassu di limonene à l'insetti adulti è l'alta toxicità di carvone sustene i risultati di certi studii precedenti40 ma cuntradite à l'altri41.A prisenza di ligami doppiu in e pusizioni intracicliche è esocicliche pò aumentà i beneficii di questi composti cum'è larvicidi3,41, mentri a carvone, chì hè una cetone cù carboni alfa è beta insaturati, pò esse un potenziale più altu di toxicità in adulti42.Tuttavia, e caratteristiche individuali di limonene è carvone sò assai più bassu di l'EO Mp totale (Table 1, Table 3).Trà i terpenoidi pruvati, l'eudesmol hè statu truvatu per avè a più grande attività larvicida è adulta cù un valore LC50 sottu à 2,5 ppm, facendu un compostu promettente per u cuntrollu di i mosquitoes Aedes.U so spettaculu hè megliu cà quellu di tuttu u EO Em, ancu s'ellu ùn hè micca coherente cù i risultati di Cheng et al.40.Eudesmol hè un sesquiterpene cù dui unità isoprene chì hè menu volatile cà i monoterpeni ossigenati cum'è l'eucalyptus è per quessa hà un putenziale maiò cum'è pesticidi.Eucalyptol stessu hà una attività adulta più grande di larvicida, è i risultati di studii precedenti sustenenu è refute questu37,43,44.L'attività sola hè quasi paragunabile à quella di tuttu l'EO Cl.Un autre monoterpène bicyclique, l'α-pinène, a moins d'effet adulte sur Aedes aegypti qu'un effet larvicide, qui est à l'opposé de l'effet de l'EO Cl complet.L'attività insetticida generale di i terpenoidi hè influinzata da a so lipofilia, volatilità, ramificazione di carbone, area di proiezione, superficia, gruppi funziunali è e so pusizioni45,46.Questi composti ponu agisce distrughjendu l'accumulazioni di cellule, bluccà l'attività respiratorja, interrompendu a trasmissione di l'impulsi nervosi, etc. 47 L'organofosfatatu sinteticu Temephos hè statu truvatu per avè l'attività larvicida più alta cù un valore LC50 di 0,43 ppm, chì hè coherente cù i dati di Lek - Utala48.L'attività adulta di u malathion di organofosforu sinteticu hè stata rappurtata à 5,44 ppm.Ancu s'è sti dui organofosfatati anu dimustratu risposti favurevuli contr'à e ceppi di laboratoriu di Aedes aegypti, a resistenza di mosquito à questi composti hè stata signalata in diverse parti di u mondu49.Tuttavia, ùn sò micca stati trovati rapporti simili di u sviluppu di a resistenza à i medicinali di erbe50.Cusì, i botanichi sò cunsiderati cum'è alternattivi potenziali à i pesticidi chimichi in i prugrammi di cuntrollu di vettore.
L'effettu larvicida hè statu pruvatu nantu à 28 cumminzioni binari (1: 1) preparati da terpenoidi potenti è terpenoidi cù thymetphos, è 9 cumminzioni sò stati trovati sinergici, 14 antagonisti è 5 antagonisti.Nisun effettu.Per d 'altra banda, in u bioassay di a putenza adulta, 7 cumminazzioni sò stati trovati sinergici, 15 cumminzioni eranu antagonisti, è 6 cumminzioni anu infurmatu chì ùn anu micca effettu.U mutivu perchè certe cumminazzioni producenu un effettu sinergicu pò esse dovutu à i composti candidati chì interagiscenu simultaneamente in diverse vie impurtanti, o à l'inibizione sequenziale di diverse enzimi chjave di una via biologica particulare51.A cumminazzioni di limonene cù disulfuru di diallyle, eucalyptus o eugenol hè stata trovata per esse sinergica in applicazioni à piccula è grande scala (Table 6), mentre chì a so cumminazione cù eucalyptus o α-pinene hè stata trovata per avè effetti antagonisti nantu à e larva.In media, u limonene pare esse un bon sinergistu, possibbilmente per a prisenza di gruppi metilici, una bona penetrazione in u stratum corneum, è un altru mecanismu d'azzione52,53.Hè statu infurmatu prima chì u limonene pò causà effetti tossichi per penetrazione di cuticuli di l'insetti (tossicità di cuntattu), affettendu u sistema digestivu (antifeedant), o affettendu u sistema respiratorju (attività di fumigazione), 54 mentre chì i fenilpropanoidi cum'è eugenol ponu influenzà l'enzimi metabolichi 55. Dunque, cumminazzioni di cumposti cù diversi miccanismi di azzione ponu aumentà l'effettu letale generale di a mistura.L'eucalyptol hè statu truvatu per esse sinergicu cù disulfuru di diallyle, eucalyptus o α-pinene, ma altri cumminzioni cù altri composti eranu o non-larvicida o antagonistiche.I primi studii anu dimustratu chì l'eucalyptol hà attività inhibitoria nantu à l'acetilcolinesterasi (AChE), è ancu l'octaamine è i receptori GABA56.Siccomu i monoterpeni ciclichi, l'eucalyptol, l'eugenol, etc. ponu avè u stessu mecanismu d'azzione cum'è a so attività neurotossica, 57 minimizendu cusì i so effetti cumminati attraversu l'inibizione mutuale.In listessu modu, a cumminazzioni di Temephos cù disulfuru di diallyle, α-pinene è limonene hè stata trovata sinergica, sustenendu i rapporti precedenti di un effettu sinergicu trà i prudutti di l'erbe è l'organofosfati sintetici58.
A cumminazzioni di eudesmol è eucalyptol hè stata trovata per avè un effettu sinergicu nantu à i stadi larvali è adulti di Aedes aegypti, possibbilmente per via di i so diversi modi d'azzione per via di e so diverse strutture chimiche.Eudesmol (un sesquiterpene) pò influenzà u sistema respiratorju 59 è eucalyptol (un monoterpene) pò influenzà l'acetilcholinesterase 60 .A co-esposizione di l'ingredienti à dui o più siti di destinazione pò rinfurzà l'effettu letale generale di a cumminazione.In i bioassays di sustanza adulta, u malathion hè statu truvatu per esse sinergicu cù carvone o eucalyptol o eucalyptol o diallyl disulfide o α-pinene, indicando chì hè sinergicu cù l'aghjunzione di limonene è di.Boni candidati allercidi sinergichi per tutta a cartera di composti terpeni, cù l'eccezzioni di allyl trisulfide.Thangam è Kathiresan61 anu ancu riportatu risultati simili di l'effettu sinergicu di malathion cù estratti di erbe.Questa risposta sinergica pò esse dovuta à l'effetti tossichi cumminati di malathion è fitochimichi nantu à l'enzimi disintossicante di l'insetti.L'organofosfati cum'è u malathion generalmente agisce inibendu l'esterase di citocromo P450 è monooxygenases62,63,64.Dunque, cumminendu malathion cù sti miccanismi d'azzione è terpeni cù diversi miccanismi d'azzione pò rinfurzà l'effettu letale generale nantu à i mosquitoes.
Per d 'altra banda, l'antagonismu indica chì i cumposti selezziunati sò menu attivi in ​​cumminazione chì ogni compostu solu.U mutivu di l'antagonismu in certi cumminzioni pò esse chì un compostu mudifica u cumpurtamentu di l'altru compostu cambiendu a rata di l'absorzione, a distribuzione, u metabolismu o l'excrezione.I primi circadori anu cunsideratu chì questu hè a causa di l'antagonismu in cumminazzioni di droghe.Molécules Possibile mecanismu 65. In modu simili, e pussibuli cause di l'antagonismu pò esse ligati à meccanismi simili d'azzione, cumpetizione di cumposti custituenti per u stessu receptore o situ di destinazione.In certi casi, l'inibizione non cumpetitiva di a proteina di destinazione pò ancu esse.In questu studiu, dui composti organosulfuri, disulfuru di diallyle è trisulfuru di diallyl, anu dimustratu effetti antagonisti, possibbilmente per via di a cumpetizione per u stessu situ di destinazione.De même, ces deux composés sulfurés présentaient des effets antagonistes et n'avaient aucun effet lorsqu'ils étaient associés à l'eudesmol et à l'α-pinène.Eudesmol è alpha-pinene sò ciclichi in natura, mentri diallyl disulfide è diallyl trisulfide sò di natura alifatica.Basatu nantu à a struttura chimica, a cumminazzioni di sti cumposti deve aumentà l'attività letale generale postu chì i so siti di destinazione sò di solitu differente34,47, ma spirimintali avemu trovu antagonismu, chì pò esse duvuta à u rolu di sti cumposti in certi organismi scunnisciutu in vivo.sistemi cum'è u risultatu di l'interazzione.In listessu modu, a cumminazzioni di cineole è α-pinene hà pruduttu risposte antagonistiche, ancu s'è i circadori anu infurmatu prima chì i dui cumposti anu diverse miri d'azzione47,60.Siccomu i dui composti sò monoterpeni ciclichi, pò esse alcuni siti di destinazione cumuni chì ponu cumpete per u ligame è influenzanu a toxicità generale di e coppie cumminatorii studiati.
Basatu nantu à i valori LC50 è a mortalità osservata, sò stati scelti i dui meglii cumminzioni di terpeni sinergici, vale à dì i coppie di carvone + limonene è eucalyptol + eudesmol, è ancu u malathion d'organofosforu sinteticu cù terpeni.A combinazione sinergica ottima di malathion + composti Eudesmol hè stata pruvata in un bioassay di insecticida per adulti.Target grandi culunii d'insetti per cunfirmà se sti cumminzioni efficaci ponu travaglià contr'à un gran numaru di individui nantu à spazii di esposizione relativamente grande.Tutte queste cumminazzioni dimustranu un effettu sinergicu contr'à i grandi insetti.I risultati simili sò stati ottenuti per una combinazione sinergica di larvicida ottimali testata contr'à grandi populazioni di larva di Aedes aegypti.Cusì, si pò dì chì a cumminazzioni synergistic larvicidal è adulticidal efficaci di cumposti EO pianta hè un forte candidatu contru à i sustanzi chimichi sintetici esistenti è pò esse usatu in più à cuntrullà pupulazioni Aedes aegypti.In listessu modu, combinazioni efficaci di larvicidi sintetici o adulticidi cù terpeni ponu ancu esse aduprati per riduce e dosi di thymetphos o malathion amministrati à i mosquitoes.Queste combinazioni sinergiche potenti ponu furnisce suluzioni per studii futuri nantu à l'evoluzione di a resistenza à a droga in i mosquitoes Aedes.
L'ova di Aedes aegypti sò stati raccolti da u Centru di Ricerca Medica Regiunale, Dibrugarh, Cunsigliu Indianu di Ricerca Medica è manteni sottu temperatura cuntrullata (28 ± 1 ° C) è umidità (85 ± 5%) in u Dipartimentu di Zoologia, Università Gauhati sottu u seguenti cundizioni: Arivoli sò state descritte et al.Dopu l'incubazione, i larvati sò stati alimentati cù l'alimentu di larva (polvu di biscottu di cane è levitu in una proporzione 3: 1) è l'adulti sò stati alimentati cù una suluzione di glucose 10%.A principiu di u 3 ghjornu dopu à l'emergenza, i moschiti femminili adulti sò stati permessi di succhià u sangue di i rati albini.Immergete a carta di filtru in acqua in un vetru è mette in a gabbia di ova.
Campioni di piante selezziunati à dì foglie d'eucalyptus (Myrtaceae), basilic santu (Lamiaceae), menta (Lamiaceae), melaleuca (Myrtaceae) è bulbi d'allium (Amaryllidaceae).Raccolta da Guwahati è identificata da u Dipartimentu di Botanica, Università Gauhati.I campioni di e piante cullate (500 g) sò stati sottumessi à hydrodistillation cù un apparatu Clevenger per 6 ore.L'EO estratta hè stata cullata in vials di vetru puliti è guardatu à 4 ° C per un studiu ulteriore.
A toxicità larvicida hè stata studiata cù e prucedure standard di l'Organizazione Mondiale di a Salute ligeramente modificate 67 .Aduprate DMSO cum'è emulsionante.Ogni cuncentrazione di EO hè stata testata inizialmente à 100 è 1000 ppm, espunendu 20 larva in ogni replicata.Basatu nantu à i risultati, un intervallu di cuncentrazione hè stata applicata è a mortalità hè stata registrata da 1 ora à 6 ore (à intervalli di 1 ora), è à 24 ore, 48 ​​ora è 72 ore dopu à u trattamentu.E cuncentrazioni subletali (LC50) sò state determinate dopu à 24, 48 è 72 ore di esposizione.Ogni cuncentrazione hè stata testata in triplicate cù un cuntrollu negativu (acqua solu) è un cuntrollu pusitivu (acqua trattata cù DMSO).Se a pupazione si trova è più di 10% di e larva di u gruppu di cuntrollu mori, l'esperimentu hè ripetutu.Se a rata di mortalità in u gruppu di cuntrollu hè trà 5-10%, utilizate a formula di correzione Abbott 68.
U metudu descrittu da Ramar et al.69 hè stata utilizata per un bioassay per adulti contr'à Aedes aegypti utilizendu acetone cum'è solvente.Ogni EO hè statu inizialmente testatu contr'à i mosquito Aedes aegypti adulti à concentrazioni di 100 è 1000 ppm.Apply 2 ml di ogni suluzione preparata à u numeru Whatman.1 pezzu di carta di filtru (taglia 12 x 15 cm2) è lasciate l'acetone evaporate per 10 minuti.U carta di filtru trattatu cù solu 2 ml d'acetone hè stata utilizata com'è cuntrollu.Dopu chì l'acetone s'hè evaporatu, u paper filtru trattatu è u filtru di cuntrollu di carta sò posti in un tubu cilindricu (10 cm deep).Dieci mosquiti di 3 à 4 ghjorni chì ùn sò micca alimentati di sangue sò stati trasferiti à triplicati di ogni cuncentrazione.Basatu nantu à i risultati di e teste preliminari, diverse concentrazioni di olii selezziunati sò stati pruvati.A mortalità hè stata registrata à 1 ora, 2 ore, 3 ore, 4 ore, 5 ore, 6 ore, 24 ore, 48 ore è 72 ore dopu a liberazione di mosquito.Calculate i valori LC50 per i tempi di esposizione di 24 ore, 48 ore è 72 ore.Se a rata di mortalità di u lottu di cuntrollu supera u 20%, ripetite a prova sana.In listessu modu, se a rata di mortalità in u gruppu di cuntrollu hè più grande di 5%, aghjustate i risultati per i campioni trattati cù a formula di Abbott68.
Cromatografia di gas (Agilent 7890A) è spettrometria di massa (Accu TOF GCv, Jeol) sò state realizate per analizà i cumposti custituenti di l'olii essenziali selezziunati.U GC era equipatu cun un detector FID è una colonna capillare (HP5-MS).U gasu trasportatore era l'heliu, u flussu era 1 ml / min.U prugramma GC stabilisce Allium sativum à 10:80-1M-8-220-5M-8-270-9M è Ocimum Sainttum à 10:80-3M-8-200-3M-10-275-1M-5 - 280, per a menta 10: 80-1M-8-200-5M-8-275-1M-5-280, per l'eucalyptus 20,60-1M-10-200-3M-30-280, è per u rossu Per mille strati sò elli 10: 60-1M-8-220-5M-8-270-3M.
I cumposti maiò di ogni EO sò stati identificati basatu annantu à u percentualità di l'area calculata da u cromatogramma GC è i risultati di spettrometria di massa (riferita à a basa di dati di standard NIST 70).
I dui cumposti maiò in ogni EO sò stati scelti nantu à i risultati GC-MS è acquistati da Sigma-Aldrich à 98-99% di purità per altri bioassays.I composti sò stati pruvati per l'efficacità larvicida è adulta contr'à Aedes aegypti cum'è descrittu sopra.I larvicidi sintetici più cumunimenti usati tamephosate (Sigma Aldrich) è u malathion di droga adulta (Sigma Aldrich) sò stati analizati per paragunà a so efficacità cù composti EO selezziunati, seguitu a stessa prucedura.
I mischi binari di composti terpeni selezziunati è composti terpeni più organofosfati cummerciale (tilephos è malathion) sò stati preparati mischjendu a dosa LC50 di ogni compostu candidatu in un rapportu 1: 1.Les combinaisons préparées ont été testées sur les stades larvaux et adultes d'Aedes aegypti comme décrit ci-dessus.Ogni bioassay hè stata realizata in triplicate per ogni cumminazione è in triplicate per i composti individuali prisenti in ogni cumminazione.A morte di l'insetti di destinazione hè stata registrata dopu à 24 ore.Calcule a rata di mortalità prevista per una mistura binaria cù a formula seguente.
induve E = u tassu di mortalità previstu di i mosquitos Aedes aegypti in risposta à una combinazione binaria, vale à dì cunnessione (A + B).
L'effettu di ogni mischju binariu hè statu etichettatu cum'è sinergicu, antagonisticu, o senza effettu basatu nantu à u valore χ2 calculatu da u metudu descrittu da Pavla52.Calcule la valeur χ2 pour chaque combinaison en utilisant la formule suivante.
L'effettu di una cumminazione hè stata definita cum'è sinergica quandu u valore di χ2 calculatu era più grande di u valore di a tabella per i gradi di libertà currispondenti (intervallu di cunfidenza di 95%) è se a mortalità osservata hè stata trovata sopra a mortalità prevista.In listessu modu, se u valore χ2 calculatu per qualsiasi cumminazzioni supera u valore di a tavula cù certi gradi di libertà, ma a mortalità osservata hè più bassa di a mortalità prevista, u trattamentu hè cunsideratu antagonistu.È se in ogni cumminazzioni u valore calculatu di χ2 hè menu di u valore di a tabella in i gradi di libertà currispundenti, a cumminazione hè cunsiderata senza effettu.
Da trè à quattru cumminazzioni potenzialmente sinergici (100 larva è 50 attività di l'insetti larvicidi è adulti) sò stati scelti per pruvà contru un gran numaru d'insetti.Adulti) prucede cum'è sopra.Inseme cù i mischi, i cumposti individuali prisenti in i mischii selezziunati sò stati pruvati ancu in quantità uguali di larva di Aedes aegypti è adulti.U rapportu di cumminazione hè una parte di dosi LC50 di un compostu candidatu è parte di dosi LC50 di l'altru compostu custituente.In u bioassay di l'attività adulta, i composti selezziunati sò stati dissolti in l'acetone di solvente è appiicati à carta di filtru impannillata in un cuntinuu di plastica cilindrica 1300 cm3.L'acetone hè stata evaporata per 10 minuti è l'adulti sò stati liberati.In u listessu modu, in u bioassay larvicidal, e dosi di composti candidati LC50 sò stati prima dissolti in volumi uguali di DMSO è poi mischiati cù 1 litru d'acqua guardatu in cuntenituri di plastica 1300 cc, è e larve sò state liberate.
L'analisi probabilistica di 71 dati di mortalità registrati hè stata realizata cù SPSS (versione 16) è u software Minitab per calculà i valori LC50.


Postu tempu: Jul-01-2024